Hoechst33258染色試劑盒
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- 公司名稱 南京賽泓瑞生物科技有限公司
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- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/12/24 8:32:37
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Hoechst33258染色試劑盒
細(xì)胞凋亡熒光Hoechst 33258檢測試劑盒
(Apoptotic Cell Hoechst 33258 Detection Kit)
Store at4℃ for one year
Expire date:
一、試劑盒說明
細(xì)胞凋亡時產(chǎn)生zui顯著的變化是染色體固縮,DNA裂解使細(xì)胞核形態(tài)產(chǎn)發(fā)生變化。本試劑盒提供的熒光染料Hoechst 33258是一種無毒、水溶性雙苯咪唑類化合物,可作為熒光探針與DNA分子結(jié)合。在凋亡細(xì)胞中,細(xì)胞膜對Hoechst 33258的攝取增高,并且由于染色體高度濃縮,Hoechst 33258與之結(jié)合增強,染色呈強藍(lán)色熒光,而正常細(xì)胞只呈微弱熒光,死細(xì)胞則不被染色,由此可檢測出凋亡。
二、試劑盒組份
組份 | KGA211(100 assays) | 儲存條件 |
Hoechst 33258 | 1.0 mL | 4℃,避光 |
Buffer A | 25 mL | 4℃ |
注: Hoechst 33258工作液的配制:使用前,取試驗盒中Hoechst 33258原液用蒸餾水稀釋10倍。
三、試劑盒以外自備儀器和試劑
熒光顯微鏡、低速離心機(jī)、微量移液器、1.5m L Microtube、載玻片、蓋玻片、4%甲醛溶液
四、使用注意事項
1. 染色時間嚴(yán)格控制,染色過久可導(dǎo)致假陽性。
2. 由于不同細(xì)胞對Hoechst 33258的攝取能力不同,該法不一定適用所有細(xì)胞。
五、操作方法
1. 用適當(dāng)?shù)姆椒ㄕT導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
2. 用冷Buffer A洗滌細(xì)胞二次,離心收集 106細(xì)胞于1.5mL微量離心管中;
(貼壁細(xì)胞原位固定染色)
3. 加入1mL 的4%甲醛溶液(用戶自備),4℃固定細(xì)胞10min;
4. 離心去固定液,用Buffer A洗兩遍;離心后留50~100μL Buffer A重懸細(xì)胞;
5. 取上步驟50~100μL細(xì)胞懸液涂片,自然晾干;
6. 滴加100μL Hoechst 33258工作液(備注1),室溫染色10 min,水沖凈晾干;
7. 以紫外光340nm波長激發(fā),熒光顯微鏡下觀察。