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DNA Ladder檢測(cè)試劑盒

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱(chēng) 南京賽泓瑞生物科技有限公司
  • 品牌
  • 型號(hào)
  • 產(chǎn)地
  • 廠(chǎng)商性質(zhì) 生產(chǎn)廠(chǎng)家
  • 更新時(shí)間 2024/12/24 8:57:44
  • 訪(fǎng)問(wèn)次數(shù) 1248
產(chǎn)品標(biāo)簽

細(xì)胞凋亡分子生物

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  南京賽泓瑞生物科技有限公司專(zhuān)注于是一家專(zhuān)注于研發(fā)和生產(chǎn)原代細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑產(chǎn)品的生物高科技企業(yè)，可以為各類(lèi)研究機(jī)構(gòu)提供符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范的原代細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞及相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)；

   南京賽泓瑞生物科技有限公司有一支由中國(guó)藥科大學(xué)和南京醫(yī)科大學(xué)多名博士組成的研發(fā)團(tuán)隊(duì)，致力于為您的細(xì)胞研究及細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)提供高品質(zhì)、穩(wěn)定性良好的產(chǎn)品，做“您身邊的細(xì)胞培養(yǎng)專(zhuān)家”。細(xì)胞培養(yǎng)提供全程服務(wù)，產(chǎn)品涵蓋原代細(xì)胞、細(xì)胞系、免疫細(xì)胞及干細(xì)胞、胎牛血清、無(wú)血清非程序凍存液、培養(yǎng)基、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、“支原體”、“黑膠蟲(chóng)”清除試劑、細(xì)胞因子、胰酶、雙抗等細(xì)胞培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)相關(guān)產(chǎn)品。

  公司設(shè)立質(zhì)量管理部，建立了高標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)檢系統(tǒng)，產(chǎn)品從原料、半成品、成品入庫(kù)到銷(xiāo)售之前，每一個(gè)環(huán)節(jié)都有嚴(yán)格的質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)，并以標(biāo)準(zhǔn)的生產(chǎn)工藝，保證產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。



胎牛血清，原代細(xì)胞，耐藥細(xì)胞，標(biāo)記細(xì)胞，LUC標(biāo)記細(xì)胞，培養(yǎng)基

 

凱基細(xì)胞凋亡DNA Ladder檢測(cè)試劑盒
（ApotosisDNA Ladder Detection Kit）
Cat number：KGA        For Research Use Only
Store at-20℃ for one year
Expire date：


 

一、試劑盒說(shuō)明
細(xì)胞核染色質(zhì)DNA斷裂是細(xì)胞凋亡的標(biāo)志特征。在細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，核酸內(nèi)切酶被激活，選擇性降解染色質(zhì)DNA，形成50-300 kb的大片段，并進(jìn)而在核小體連接處斷裂，形成180-200 bp或其整倍數(shù)的DNA片段，這些DNA片段可從細(xì)胞中提取出來(lái)，通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳，溴化乙啶染色呈現(xiàn)為梯狀條帶（DNA Ladder），并據(jù)此判斷細(xì)胞凋亡產(chǎn)生。凱基細(xì)胞凋亡DNA Ladder檢測(cè)試劑盒提供了一種簡(jiǎn)便、快速地提取染色質(zhì)DNA的方法，并增加對(duì)小片段DNA的回收，從而增強(qiáng)了檢測(cè)的敏感性。
本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞凋亡檢測(cè)（不*用于檢測(cè)組織樣本）。
二、試劑盒組份

組份
Cat:KGA111（20 assays）
Cat:KGA112（50 assays）
Cat:KGA113（100 assays）
儲(chǔ)存條件
 
Lysis Buffer
4 mL
10 mL
20 mL
4℃
Solution A
400μL
1.0 mL
2.0 mL
-4℃
Enzyme A
400μL
1.0 mL
2.0 mL
-20℃
Enzyme B
400μL
1.0 mL
2.0 mL
-20℃
Precipitant
3.0 mL
6.5 mL
13.0 mL
4℃
Loading Buffer
80μL
0.2 mL
0.4 mL
4℃

三、試劑盒以外自備儀器和試劑
高速離心機(jī)、微量移液器、渦旋振蕩器、凝膠電泳儀、37-55℃水浴
1.5m L Microtube、PBS、胰酶消化液、冰乙醇、TE Buffer，瓊脂糖，TBE、溴化乙啶、DNA Ladder Marker
四、使用注意事項(xiàng)
1. DNA  Ladder出現(xiàn)在細(xì)胞凋亡晚期，觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)已發(fā)生皺縮出芽，染色質(zhì)*凝聚，細(xì)胞核已固縮斷裂的凋亡晚期形態(tài)，建議該種形態(tài)的凋亡細(xì)胞比例在30%以上時(shí)進(jìn)行DNA  Ladder檢測(cè)或*行Tunel檢測(cè)，
2.  DNA Ladder出現(xiàn)在一個(gè)較短的時(shí)間段，在凋亡早期取樣，則無(wú)DNA降解的條, 帶，而在凋亡末期取樣則產(chǎn)生與細(xì)胞壞死相似的DNA彌散條芾。因此取樣時(shí)間需根椐不同種類(lèi)的細(xì)胞和誘導(dǎo)劑而摸索確定。
3. 貼壁細(xì)胞不用胰酶消化而用細(xì)胞刮收集。
4. 某些細(xì)胞不產(chǎn)生這種核小體間的DNA斷裂，而是產(chǎn)生50-300kb的大片段斷裂。
五、操作方法
1．   離心收集105~106細(xì)胞（1500×g，離心5min）于1.5mL微量離心管中；
2．   用PBS洗滌細(xì)胞二次（1500×g，離心5min），棄上清；
3．   沉淀的細(xì)胞中加入100μL Lysis Buffer，渦旋振蕩器上劇烈混合10秒， 1000×g，離心5min后移上清于另一1.5mL微量離心管中；
4．   沉淀再加入100μL Lysis Buffer重復(fù)上步，合并兩次的上清液；
5．   在上述合并的上清液中加入20μL Solution A，再加入20μL Enzyme A， 55℃反應(yīng)1小時(shí)；
6．   加入20μL Enzyme B,37℃孵育1小時(shí)；
7．   加入130μL Precipitant和950μL冰乙醇, 混勻，置—20℃,1小時(shí)以上或過(guò)夜；
8．   4℃，12，000-14，000 rpm離心15-30min，小心地棄去上清，收集沉淀的DNA；
9．   加入0.5mL 70%的冷乙醇，洗DNA沉淀，再12，000-14，000 rpm離心20min；
10．棄上清，DNA沉淀于室溫干燥10 min后，加入10-15μL TE Buffer，充分?jǐn)嚢枞芙?/span>DNA；
11．取上述10-15μL樣品加入2-3μL Loading Buffer， 1.5%瓊脂糖凝膠電泳（凝膠和電泳緩沖液TBE均加入0.5μg/mL的溴化乙啶）；
12．5V/cm電泳1小時(shí)，紫外燈下觀(guān)察并拍照。


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