Con A瓊脂糖凝膠4B

  Con A瓊脂糖凝膠4B簡介：

英文名稱：Con A Sepharose 4B
其他名稱：拌刀豆球蛋白瓊脂糖凝膠4B
Ligand density：10-16mg Con A/ml drained medium
Available capacity：20-45mg porcine thyroglobulin/ml medium
Bead structure：4% agarose
Bead size range：45～165um
Mean bead size：90um
Max linear flow rate：75cm/h at 25℃；HR 16/10 column；5cm bed height
pH stability：long term and working,short term ：4～9
Chemical stability：Stable to all commonly used aqueous buffers.Chelating agents such as EDTA, 8 M urea or solutions having a pH below 3 should be avoided as these conditions results in removal of manganese from the lectin with loss of activity as a result
Physical stability：Negligible volume variation due to changes in pH or ionic strength
 Con A瓊脂糖凝膠4B親和介質(zhì)使用:
1、 裝柱：該介質(zhì)凝膠從4℃冰箱中取出后在室溫下緩慢振搖恢復(fù)到室溫，然后再裝柱，以免產(chǎn)生氣泡影響柱效。
2、 平衡：結(jié)合緩沖液（Binding Buffer）為20mmol/LTris-HCl緩沖液，pH7.4，其中含1mM MnCl2，1mM CaCl2，0.15M NaCl。由于介質(zhì)保存液含有20%乙醇，因此裝好柱的介質(zhì)必須進(jìn)行平衡。平衡介質(zhì)所需的液體約為10個柱床體積。由于凝集素和糖基結(jié)合強(qiáng)度弱，為促進(jìn)糖基結(jié)合，清洗緩沖液中可以不含有0.15M NaCl。
3、 吸附：預(yù)分離組分經(jīng)過結(jié)合緩沖液透析后進(jìn)行上柱吸附。
4、 清洗：待預(yù)分離組分已經(jīng)都進(jìn)入介質(zhì)中后，加入清洗液體，洗去非特異吸附蛋白，大約5-10倍柱體積。
5、 洗脫：可以用0.1-0.5M糖類進(jìn)行線性或梯度洗脫，例如用α-甲基-D-甘露糖苷（α-D-methylmannoside），或α-甲基-D-葡萄糖苷（α-D-methylglucoside），緩沖液為20mmol/L Tris-HCl緩沖液，pH7.4，并含有0.15M NaCl。強(qiáng)結(jié)合組分可以采用低pH值（但不得低于pH3）緩沖液 ,即用0.1M,pH6.5的硼酸緩沖液進(jìn)行洗脫。
親和介質(zhì)再生：
ConA 瓊脂糖凝膠的再生處理方法：每次采用2-3倍體積、含0.5M/L NaCL、高pH（8.5）值和低pH（4.5）緩沖液交替清洗柱子，交替3次。再用3-5倍體積的清洗緩沖液清洗。高pH值緩沖液可以采用0.1MTris-HCL,低pH值緩沖液可以采用0.1M檸檬酸緩沖液。洗脫強(qiáng)力結(jié)合的組分，可以采用20-50%乙醇線性洗脫
用途：Con A 瓊脂糖凝膠用于各種含甘露醇及葡萄糖殘基的糖、糖蛋白、糖脂等物質(zhì)的分離純化
保存：2～8℃