解決方案 | GPC在測(cè)量殼聚糖分子量及分布上的應(yīng)用

殼聚糖及其測(cè)定

殼聚糖是目前研究多的多糖類天然高分子材料，對(duì)于生物體來說，殼聚糖具有優(yōu)良的生物相容性和降解性。將其植入人體后，可被人體組織中的酶緩慢吸收，是用來制作縫線和創(chuàng)傷覆蓋材料的優(yōu)秀高分子材料。由于其*的性能，使得殼聚糖在化工、 輕工、 醫(yī)藥、 食品及環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域中的開發(fā)應(yīng)用研究十分活躍。

殼聚糖的學(xué)名為β-（1，4）聚-2-氨基-D-葡萄糖，是甲殼素重要的衍生物,是除蛋白質(zhì)以外含氮量大的有機(jī)氮源,也是自然界中僅有的堿性多糖，其相對(duì)分子量通常在10萬-30萬，但幾乎不溶于水，其中分子量是影響殼聚糖溶解性的主要因素之一，分子量越低其溶解性就越好。

凝膠色譜法(GPC)是測(cè)定殼聚糖相對(duì)分子質(zhì)量及其分布的常用方法，這將有助于推動(dòng)殼聚糖作為生物醫(yī)用材料的選擇和設(shè)計(jì)。

應(yīng)用案例——GPC測(cè)定殼聚糖

本案例基于Waters1515凝膠色譜儀，搭配Ultrahydrogel色譜柱，對(duì)市售殼聚糖的相對(duì)分子量及分布進(jìn)行計(jì)算。

1、儀器

                                     ▲Waters1515凝膠色譜儀，配示差檢測(cè)器 

2、標(biāo)準(zhǔn)品

聚乙二醇標(biāo)準(zhǔn)品套組

3、實(shí)驗(yàn)條件

01RI流通池溫度

40 °C

02流動(dòng)相

50 mM 的醋酸+100 mM 硝酸鈉緩沖液

03流速

0.45 mL/min

04色譜柱

Waters Ultrahydrogel 2000柱，7.8 ×300 mm

05柱溫

40 °C 

06樣品稀釋劑

50 mM 的醋酸+100 mM 硝酸鈉緩沖液

07進(jìn)樣量

50 μL

08數(shù)據(jù)處理軟件

Empower QS +GPC計(jì)算模塊色譜數(shù)據(jù)軟件

09樣品處理

1 mg/mL的殼聚糖

4、結(jié)果與討論

殼聚糖樣品的色譜圖如下：

圖1. 殼聚糖樣品色譜圖

利用Empower QS中GPC選項(xiàng)的功能，采用標(biāo)樣的保留時(shí)間繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，來計(jì)算殼聚糖樣品的分子量分布，軟件會(huì)自動(dòng)計(jì)算出對(duì)應(yīng)的重均分子量(Mw)、數(shù)均分子量(Mn)、多分散性等相關(guān)參數(shù)。

連續(xù)6針進(jìn)樣的重復(fù)性色譜圖如下，通過計(jì)算Mw的RSD小于0.2%，表明此方法重復(fù)性良好。

Waters GPC優(yōu)勢(shì)

行業(yè)先導(dǎo)Waters 從 1963 年起就致力于 GPC 技術(shù)的研究和開發(fā)，經(jīng)過 50 多年的發(fā)展，使Waters 成長(zhǎng)為 GPC 技術(shù)的前鋒。
專業(yè) 多項(xiàng)*技術(shù)加持，保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性及重現(xiàn)性。
易上手 簡(jiǎn)單、易操作，性能穩(wěn)定，專為高聚物領(lǐng)域量身打造。

參考文獻(xiàn)

[1] 凝膠滲透色譜法研究殼聚糖生物材料酶降解過程的均勻性

[2] 用GPC研究殼聚糖氧化降解過程中的分子量及其分布_劉羿君

[3] 殼聚糖作為醫(yī)用高分子綜述-王霞