福利+干貨＞2，讀透草甘膦衍生要點

2022年3月15日，國家市場監(jiān)督管理總局和國家標準化管理委員會聯(lián)合發(fā)布《生活飲用水衛(wèi)生標準》等5項強制性國家標準。新發(fā)布的《生活飲用水衛(wèi)生標準》標準號定為GB5749-2022，將于2023年4月1日起正式實行，全面代替現(xiàn)行的GB5749-2006。

                            圖1：《生活飲用水衛(wèi)生標準》發(fā)布

本次修訂對標準的范圍進行了更加明確的表述，對規(guī)范性引用文件及檢驗方法進行了更新，其中農(nóng)殘的測試仍占據(jù)很大的比重?？梢娢覈鴮τ谵r(nóng)殘危害以及檢測依舊高度重視。

草甘膦作為通用型的廣譜殺蟲劑，日常的使用占比很大，在常規(guī)的環(huán)境檢測中均屬于必檢項目。而在2022版的《生活飲用水衛(wèi)生標準》中依然沿用了，草甘膦的經(jīng)典測試方法——柱后衍生法。

針對標準相關要求，Pickering實驗室開發(fā)了“草甘磷的完整應用方案"，本文也將剖析草甘磷衍生化中的關鍵問題，并進行逐一解釋。

草甘膦的衍生化原理是什么呢？

草甘膦和AMPA在強陽離子交換柱上*磺化，交聯(lián)、分離。等度分離后，用柱再生液（Pickering Lot No.RG019）再生色譜柱后，再用洗脫液重新平衡。熒光檢測遵循兩階段柱后反應。

第一階段，草甘膦通過次氯酸鹽被氧化成氨基乙酸。在第二階段，氨基乙酸與OPA(Pickering Lot No.0120)和Thiofluor™（Pickering Lot No.3700-2000）在pH值為9-10反應時產(chǎn)生高熒光的異吲哚。而AMPA不需要初始氧化，可直接與OPA反應，事實上，氧化會降低AMPA的熒光效應。（如圖2所示）

                             圖2：氧化會降低AMPA的熒光效應

為何需同時測試草甘膦及AMPA？

根據(jù)標準要求，需同時測試草甘膦及氨甲基膦酸（AMPA）。

這是因為，按照標準要求，衍生溶液制備過程中，OPA稀釋液(Pickering Lot No.GA116)中需加入5%次氯酸鈉溶液。草甘磷在含氯消毒液中會發(fā)生降解，信號值發(fā)生變化，AMPA作為草甘膦的降解產(chǎn)物，在測試過程中與草甘膦信號值有對應關系，可幫助校準和確定草甘膦信號值是否達到佳狀態(tài)。（參考圖3）

                               圖3：AMPA與草甘膦信號值有對應關系

此處請注意：在添加時次氯酸鈉的濃度非常重要，目前市面上出售的溶液濃度標示有不準確情況，建議先從低濃度加起，緩慢調(diào)整。

Pickering應用方案的方法靈敏度如何？

根據(jù)標準要求“本方法草甘膦和氨甲基膦酸的限制檢測質(zhì)量均為5.0 ng，若取200 μL直接進樣，則限制檢測質(zhì)量濃度均為25 μg/L。"

Pickering應用方案在優(yōu)化流動相（Pickering Lot No.GA104、K200）梯度情況下，可達到100μL進樣，lowest檢測濃度達到12 μg/L,*方法要求。

                                   圖4：12ug/L草甘膦

Pickering推薦配置方案&獲取方式

                           圖5：Pickering推薦配置方案

上述配置方案，還可用于擴展甲萘威等農(nóng)殘的測試。