GB5009 色譜柱

GB5009 色譜柱 采用TSKgel 色譜柱參考GB5009.194-2003 分析保健食品中免疫球蛋白IgG，IgG 是免疫球蛋白G(Immunoglobulin G，IgG)的縮寫，是血清主要的抗體成分，約占血清Ig 的75%。其中40～50%分布于血清中，其余分布在組織中。IgG 是可以通過胎盤的免疫球蛋白。IgG 的功能作用主要在機(jī)體免疫中起保護(hù)作用，大多數(shù)抗菌、抗病毒；應(yīng)對(duì)麻疹、甲型肝炎等，能有效地預(yù)防相應(yīng)的感染性疾病。免疫球蛋白分為五類，即免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白D（IgD）和免疫球蛋白E（IgE）。

GB5009 色譜柱 本應(yīng)用參考GB 5009.194-2003，采用高效液相色譜法，選用親和色譜柱TSKgel ProteinA-5PW對(duì)保健食品中免疫球蛋白IgG進(jìn)行檢測(cè)。

溶液配制

對(duì)照品溶液制備：稱取IgG 標(biāo)準(zhǔn)品（Sigma）0.01 g，用流動(dòng)相A 溶解并定容

10.0 mL，搖勻，濃度為1.0 mg/mL。

供試品溶液制備：稱取0.13 g 初乳素左右，用流動(dòng)相A 稀釋25.0 mL，搖勻，

通過0.45 μm 微孔濾膜后進(jìn)樣。

分析條件

儀器：UltiMate3000

色譜柱：TSKgel ProteinA-5PW (4.6 mmI.D.×3.5 cm)

流動(dòng)相A：pH6.5，0.05 mol/L 磷酸鹽緩沖液

流動(dòng)相B：pH2.5，0.05 mol/L 甘氨酸鹽酸鹽緩沖液

流速：0.4 mL/min

柱溫：35 ℃

進(jìn)樣體積：20 μL

檢測(cè)器：UV 280 nm

梯度洗脫表見表1

分析結(jié)果

結(jié)論：

IgG 與前面雜質(zhì)峰的分離度Rs 為18.99，兩次進(jìn)樣測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均差值與算術(shù)平均值比值為0.26%，滿足算術(shù)平均差值與算術(shù)平均值比值小于10.0%。

采用上述方法可以滿足國標(biāo)GB 5009.194-2003 對(duì)IgG 分析測(cè)定要求。