總磷是水樣經(jīng)消解后將各種形態(tài)的磷轉(zhuǎn)變成正磷酸鹽后測(cè)定的結(jié)果，以每升水樣含磷毫克數(shù)計(jì)量。
根據(jù)GB/T10647 飼料業(yè)術(shù)語(yǔ) 總磷 (total phosphorus;TP)飼料中以無(wú)機(jī)態(tài)和有機(jī)態(tài)存在的磷的總和。
測(cè)定方法
正磷酸鹽的常用測(cè)定方法有3種:
①釩鉬磷酸比色法。此法靈敏度較低，但干擾物質(zhì)較少。
②鉬-銻-鈧比色法。靈敏度，顏色穩(wěn)定，重復(fù)性好。
③氯化亞錫法。雖靈敏但穩(wěn)定性差，受氯離子、硫酸鹽等干擾。
磷是畜禽飼料中的重要標(biāo),畜禽對(duì)磷的攝入量不足或過(guò)量都將嚴(yán)重影響畜禽健康,因此飼料經(jīng)常檢測(cè)。根據(jù) GB/T6437 飼料中總磷的測(cè)定 分光光度法 采用釩鉬磷酸比色法的原理。
應(yīng)用
水中磷可以元素磷、正磷酸鹽、縮合磷酸鹽、焦磷酸鹽、偏磷酸鹽和有機(jī)團(tuán)結(jié)合的磷酸鹽等形式存在。其主要來(lái)源為生活污水、化肥、有機(jī)磷農(nóng)藥及近代洗滌劑所用的磷酸鹽增潔劑等。磷酸鹽會(huì)干擾水廠中的混凝過(guò)程。水體中的磷是藻類(lèi)生長(zhǎng)需要的種關(guān)鍵元素，過(guò)量磷是成水體污穢異臭，使湖泊發(fā)生富營(yíng)養(yǎng)化和海灣出現(xiàn)赤潮的主要原因。我地面水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(G3838-2002)規(guī)定總磷容許值如下。
| | I類(lèi) | II類(lèi) | III類(lèi) | IV類(lèi) | V類(lèi) |
總磷(以P)計(jì)(mg/L) ≤ | 0.02 | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 |
0.01(湖、庫(kù)) | 0.025(湖、庫(kù)) | 0.050(湖、庫(kù)) | 0.1(湖、庫(kù)) | 0.2(湖、庫(kù)) |
磷是飼料中的種營(yíng)養(yǎng)素，是飼料的構(gòu)成成分，是動(dòng)物需的常量礦物元素?？偭资欠从筹暳现辛缀克降臉?biāo)。對(duì)單胃動(dòng)物來(lái)說(shuō)，總磷中含有的植酸磷是其所不能利用的，飼料總可以被動(dòng)物利用的分稱(chēng)為有效磷。對(duì)反芻動(dòng)物來(lái)說(shuō)，由于消化道中存在分解植酸磷的植酸酶，因此可根據(jù)原料中總磷的含量和動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)需要量來(lái)配方。
總磷的測(cè)定
鉬酸銨分光光度法GB 11893-89
1 主題內(nèi)容與適用范圍:
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用過(guò)硫酸鉀(或硝酸-氯酸)為氧化劑，將未經(jīng)過(guò)濾的水樣消解，用鉬酸銨分光光度測(cè)定總磷的方法。總磷包括溶解的、顆粒的、有機(jī)的和無(wú)機(jī)磷。本標(biāo)準(zhǔn)適用于地面水、污水和業(yè)廢水。取25mL試料，本標(biāo)準(zhǔn)的zui低檢出濃度為0.01mg/L，測(cè)定上限為0.6mg/L。在酸性條件下，砷、鉻、硫干擾測(cè)定。
2 原理:
在中性條件下用過(guò)硫酸鉀(或硝酸-氯酸)使試樣消解，將所含磷氧化為正磷酸鹽。在酸性介質(zhì)中，正磷酸鹽與鉬酸銨反應(yīng)，在銻鹽存在下生成磷鉬雜多酸后，立即被抗壞血酸還原，生成藍(lán)色的絡(luò)合物。
3 試劑:
本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑除另有說(shuō)明外，均應(yīng)使用符合家標(biāo)準(zhǔn)或業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的分析試劑和蒸餾水或同等純度的水。
3.1 硫酸(H2SO4)，密度為1.84g/mL。
3.2 硝酸(HNO3)，密度為1.4g/mL。
3.3 氯酸(HClO4)，優(yōu)純，密度為1.68g/mL。
3.4 硫酸(H2SO4)，1+1。
3.5 硫酸，約c(1/2H2SO4)=1mo1/L:將27mL硫酸(3.1)加入到973mL水中。
3.6 氫氧化鈉(NaOH)，1mo1/L溶液:將40g氫氧化鈉溶于水并稀釋至1000mL。
3.7 氫氧化鈉(NaOH)，6mo1/L溶液;將240g氫氧化鈉溶于水并稀釋至1000mL。
3.8 過(guò)硫酸鉀，50g/L溶液:將5g過(guò)硫酸鉀(K2S2O8)溶解干水，并稀釋至100mL。
3.9 抗壞血酸，100g/L溶液:溶解10g抗壞血酸(C6H8O6)于水中，并稀釋至100mL。此溶液貯于棕色的試劑瓶中，在冷處可穩(wěn)定幾周。如不變色可長(zhǎng)時(shí)間使用。
3.10 鉬酸鹽溶液:溶解13g鉬酸銨[(NH4)6Mo7O24·4H2O]于100mL水中。溶解0.35g酒石酸銻鉀KSbC4H4O7· 1/2 H2O]于100mL水中。在不斷攪拌下把鉬酸銨溶液徐徐加到300mL硫酸(3.4)中，加酒石酸銻鉀溶液并且混合均勻。此溶液貯存于棕色試劑瓶中，放在約4攝氏度處可保存二個(gè)月。
3.11 濁度色度補(bǔ)償液:混合兩個(gè)體積硫酸(3.4)和個(gè)體積抗壞血酸溶液(3.9)。使用當(dāng)天配制。
3.12 磷標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液:稱(chēng)取0.2197±0.001g于110℃干燥2h在干燥器中放冷的磷酸二氫鉀(KH2PO4)，用水溶解后轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，加入大約800mL水、加5mL硫酸(3.4)用水稀釋至標(biāo)線并混勻。1.00mL此標(biāo)準(zhǔn)溶液含50.0μg磷。本溶液在玻璃瓶中可貯存至少六個(gè)月。
3.13 磷標(biāo)準(zhǔn)使用溶液:將10.0mL的磷標(biāo)準(zhǔn)溶液(3.12)轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線并混勻。1.00mL此標(biāo)準(zhǔn)溶液含2.0μg磷。使用當(dāng)天配制。
3.14 酚酞，10g/L溶液:0.5g酚酞溶于50mL95%乙醇中。
4 儀器 實(shí)驗(yàn)室常用儀器設(shè)備和下列儀器。
4.1 用手提式蒸氣消毒器或般壓力鍋(1.1~1.4kg/cm2)。
4.2 50mL具塞(磨口)刻度管。
4.3 分光光度計(jì)。注:所有玻璃器皿均應(yīng)用稀鹽酸或稀硝酸浸泡。
5 采樣和樣品
5.1 采取500mL水樣后加入1mL硫酸(3.1)調(diào)節(jié)樣品的pH值，使之低于或等于1，或不加何試劑于冷處保存。注:含磷量較少的水樣，不要用塑料瓶采樣，因易磷酸鹽吸附在塑料瓶壁上。
5.2 試樣的制備:取25mL樣品(5.1)于具塞刻度管中(4.2)。取時(shí)應(yīng)仔細(xì)搖勻，以得到溶解分和懸浮分均具有代表性的試樣。如樣品中含磷濃度較，試樣體積可以減少。
6 分析步驟:
6.1 試樣按(6.2)的規(guī)定行試驗(yàn)，用水代替試樣，并加入與測(cè)定時(shí)相同體積的試劑。6.2 測(cè)定 :6.2.1 消解:
6.2.1.1 過(guò)硫酸鉀消解:向(5.2)試樣中加4mL過(guò)硫酸鉀(3.8)，將具塞刻度管的蓋塞緊后，用小塊布和線將玻璃塞扎緊(或用其他方法固定)，放在大燒杯中置于壓蒸氣消毒器(4.1)中加熱，待壓力達(dá)1.1kg/cm2，相應(yīng)溫度為120℃時(shí)、保持30min后停止加熱。待壓力表讀數(shù)降至零后，取出放冷。然后用水稀釋至標(biāo)線。注:如用硫酸保存水樣。當(dāng)用過(guò)硫酸鉀消解時(shí)，需將試樣調(diào)至中性。
6.2.1.2 硝酸-氯酸消解:取25mL試樣(5.1)于錐形瓶中，加數(shù)粒玻璃珠，加2mL硝酸(3.2)在電熱板上加熱濃縮至10mL。冷后加5mL硝酸(3.2)，再加熱濃縮至10mL，放冷。加3mL氯酸(3.3)，加熱至氯酸冒白煙，此時(shí)可在錐形瓶上加小漏斗或調(diào)節(jié)電熱板溫度，使消解液在錐形瓶?jī)?nèi)壁保持回狀態(tài)，直至剩下3~4mL，放冷。加水10mL，加1滴酚酞示劑(3.14)。滴加氫氧化鈉溶液(3.6或3.7)至剛呈微紅色，再滴加硫酸溶液(3.5)使微紅剛好退去，充分混勻。移至具塞刻度管中(4.2)，用水稀釋至標(biāo)線。
注:①用硝酸-氯酸消解需要在通風(fēng)櫥中行。氯酸和有機(jī)物的混合物經(jīng)加熱易發(fā)生危險(xiǎn)，需將試樣用硝酸消解，然后再加入硝-酸氯酸行消解。②不可把消解的試作蒸干。③如消解后有殘?jiān)鼤r(shí)，用濾紙過(guò)濾于具塞刻度管中，并用水充分清洗錐形瓶及濾紙，并移到具塞刻度管中。 ④水作中的有機(jī)物用過(guò)硫酸鉀氧化不能破壞時(shí)，可用此法消解。6.2.2 發(fā)色 :分別向各份消解液中加入1mL抗壞血酸溶液(3.9)混勻，30s后加2mL鉬酸鹽溶液(3.10)充分混勻。注:①如試樣中含有濁度或色度時(shí)，需配制個(gè)試樣(消解后用水稀釋至標(biāo)線)然后向試料中加入3mL濁度--色度補(bǔ)償液(3.11)，但不加抗壞血酸溶液和鉬酸鹽溶液。然后從試料的吸光度中扣除試料的吸光度。②砷大于2mg/L干擾測(cè)定，用硫代硫酸鈉去除。硫化物大于2mg/L干擾測(cè)定，通氮?dú)馊コ?。鉻大于50mg/L干擾測(cè)定，用亞硫酸鈉去除。6.2.3 分光光度測(cè)量:室溫下放置15min后，使用光程為10mm或30mm比色皿，在700nm波長(zhǎng)下，以水做參比，測(cè)定吸光度?？鄢囼?yàn)的吸光度后，從作曲線(6.2.4)上查得磷的含量。注:如顯色時(shí)室溫低于13℃，可在20~30℃水浴中顯色15min即可。 6.2.4 作曲線的繪制 取7支具塞刻度管(4.2)分別加入0.0，0.50，1.00，3.00，5.00，10.0，15.0mL磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液(3.14)。加水至50mL。然后按測(cè)定步驟(6.2)行處理。以水做參比，測(cè)定吸光度。扣除試驗(yàn)的吸光度后，和對(duì)應(yīng)的磷的含量繪制作曲線。 7 結(jié)果的表示: 總磷含量以C(mg/L)表示，按下式計(jì)算:C=m/V 式中:m--試樣測(cè)得含磷量，μg; V--測(cè)定用試樣體積，mL。
