液相色譜儀串聯(lián)質(zhì)譜的檢測流程方法總匯

如今蛋白組/代謝組學(xué)被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域，液相色譜儀串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)（液質(zhì)聯(lián)用）是蛋白組/代謝組學(xué)研究的主要手段，因此液質(zhì)聯(lián)用受到了醫(yī)學(xué)科學(xué)的極大重視。那么今天就來了解一下液質(zhì)聯(lián)用的基本流程吧！

液相色譜部分由進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)三個部分組成

（1）進(jìn)樣裝置要求密封性好，死體積小，重復(fù)性好，保證中心進(jìn)樣，進(jìn)樣時對色譜系統(tǒng)的壓力、流量影響小。

（2）輸液系統(tǒng)較為主要的是梯度洗脫裝置——有兩種方式：一種稱低壓梯度，指常壓下溶劑按一定比例混合后再由高壓泵輸入色譜柱，又稱外梯度；另一種稱高壓梯度，指先用高壓泵將各溶劑輸入混合器混合，再送入色譜柱，也稱為內(nèi)梯度。

（3）分離系統(tǒng)包括色譜柱、連接管和恒溫器等。與單純LC相比，LC-MS一般流速較低（高流速可能影響霧化效果），所以一般用窄徑柱，即2 mm或2.1mm的，粒徑一般為3.5μm，也有1.7μm的。

液相色譜儀分析的一般流程

（1）ESI電離：其工作原理是將液滴變成蒸汽，產(chǎn)生離子發(fā)射的過程中形成的溶劑由液相泵輸送到ESI Probe，經(jīng)其內(nèi)的不銹鋼毛細(xì)管流出，這時給毛細(xì)管加2－4 kv的高壓，由于高壓和霧化氣的作用，流動相從毛細(xì)管頂端流出時，會形成扇狀噴霧，使液滴生成含樣品和溶劑離子的氣溶膠。ESI屬于較軟的電離方式，通常只產(chǎn)生分子離子峰。適合熱不穩(wěn)定的極性分子，能分析小分子及大分子。

（2）四極桿質(zhì)量分析器：四極桿內(nèi)所包圍的空間存在雙曲線形電場。從離子源入射的加速離子穿過四極桿中的電場會受到電場作用，只有選定的m/z離子以限定的頻率穩(wěn)定的通過四極桿質(zhì)量分析器，其他離子則碰到極桿上被吸濾掉，不能通過，即達(dá)到“濾質(zhì)”的作用。四極桿質(zhì)量分析器結(jié)構(gòu)緊湊，體積小，掃描速度快，適用于LC-MS聯(lián)用儀。