島津液相色譜儀檢測清熱止咳糖漿黃芩苷含量

1 實(shí)驗(yàn)所需要的儀器： LC—10A液相色譜儀（日本 島津）。紫外檢測器（SPD—IOA）。DT一100分析天平。清熱止咳糖漿共 5批號。黃芩苷對照 品（中國藥 品生物制品檢定所）。試劑均為分析純。

2 測定條件 色譜柱 Hypersll ODS柱 （250mm×4 Omm，5,um）；流動(dòng)相：乙腈一甲醇一O 2％  P04（10：35：55）；檢測波長 ：28Onto；流速1 Oral／rain；柱溫 ：室溫 ；進(jìn)樣量 ：20tA。

3 樣品制備

3．1 供試品液的制備  精密量取 清熱止 咳糖漿 樣品 lml。置 lOOml量瓶中，加水至刻度，搖勻 。用 0．451~m微孔濾膜濾過 ，進(jìn)樣。

3．2 對照品溶液的制備  取對照 品黃芩 苷適量 。加流 動(dòng)相配制成 0．1mg／ml對照品溶液 ，進(jìn)樣。

3．3 空白樣品的制備 量取缺 黃芩 藥昧 的空 白樣品 1m1．置 lOOml量瓶中，加水至刻度，搖勻  用 0．45／~m微孔濾膜過濾 ，進(jìn)樣。

4 測定方法與結(jié)果

4．1  色譜圖 黃芩苷的峰保 留時(shí)間約為 5．9rain；黃芩苷與其相鄰峰的分離度大于2；以黃芩苷峰計(jì)算理淪板數(shù)約7000，清熱止咳糖漿中其它成分對黃芩苷的含量測定沒有影響 ；空白樣 品無干擾 。

4．2 線性 關(guān)系  精密稱取黃芩苷對照品 27．60rag置于 5Oral量瓶中，用流動(dòng)相溶解定容作 為儲備 液，精 密吸取 1、2、4、6、8rnl各置于 lOml的量瓶中用流動(dòng)相稀釋定容。進(jìn)樣20t~l。以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo) ，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 ，得 回歸方程為 Y=40537．5X一107．87，r=0．99995（rl 5），表明黃芩 苷濃度在 55．4—44l_8  ml范 圍內(nèi)線性關(guān)系良好

4．3 精密度試驗(yàn) 取濃度為200．8 g／ml的黃芩苷對照液 2 l連續(xù)進(jìn)樣 5次。結(jié)果：黃芩苷峰面積積分值的 tlSD為0．55％（n 5）。

4．4 回收率試驗(yàn)  分別 量取 已知含量 的樣品 0．5ml，置于 100ml量瓶中，精密加入黃芩苷對照品4．8、4．9、6．0、6．2、7．2、7．3rag。用蒸餾水溶解井稀釋至刻度、搖勻。用O．45”m的微孔濾膜過濾，進(jìn)樣，結(jié)果加樣回收率 10335％（RSD=0．84％，n=6）。

4．5 重現(xiàn)性試驗(yàn) 取同一批號樣品（040208）5份，分別按樣品測定法測定。測定5次，測得平均含量為 l3．55％mr．／ml，RSD=0．43％。

5討論 黃芩是清熱止咳糖漿中的主藥，黃芩苷是黃芩中的主要成份，因此測定黃芩苷含量可作為質(zhì)控的一個(gè)重要指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)采用 HPLC測定清熱止咳糖漿中黃芩苷的含量。色譜分析十分理想，結(jié)果準(zhǔn)確。由于樣品是水溶液，所以直接用水稀釋進(jìn)樣即可。流動(dòng)相加人乙腈能使色譜峰峰形巫加尖銳，分離度也更好，而且流動(dòng)相的酸度降低，減少了對柱的損壞。