01
人血白蛋白是由乙型肝炎疫苗免疫健康人的血漿經(jīng)低溫乙醇蛋白分離法提取并經(jīng)病毒滅活后制成。用于治療因失血、創(chuàng)傷和燒傷引起的休克,腦水腫及大腦損傷所致的腦壓增高,防治低蛋白血癥以及肝硬化或腎病引起的水腫或腹水。蛋白質(zhì)含量是人血白蛋白質(zhì)量評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)。
常規(guī)的白蛋白含量的測(cè)定方法是:血細(xì)胞分析儀,雙縮脲比色法,凱氏定氮,紫外光吸收法等方法均需加入試劑,增加反應(yīng)時(shí)間,實(shí)驗(yàn)步驟繁多,費(fèi)時(shí)復(fù)雜。本方法是根據(jù)不同介質(zhì)的折射率不同的物理特性,通過(guò)折射率讀數(shù),計(jì)算出蛋白含量。
2010 版中國(guó)藥典第三部明確將折光法運(yùn)用于單份血漿中蛋白質(zhì)含量的測(cè)定
儀器
Abbemat 500 折光儀
樣品
人血白蛋白,免疫球蛋白
試劑
純化水、無(wú)水乙醇
測(cè)試
過(guò)程
1. 開(kāi)機(jī),調(diào)用方法:Refractive Index。
2. 用純化水(20℃)進(jìn)行校驗(yàn),校驗(yàn)通過(guò)。
3. 配置標(biāo)準(zhǔn)曲線:免疫求蛋白、人血白蛋白
4. 取一小滴樣品,直接放置在棱鏡上,設(shè)置溫度為20℃,等待溫度穩(wěn)定后,按start 鍵進(jìn)行測(cè)量。
5. 測(cè)量結(jié)束后,將樣品擦除,并用純化水和無(wú)水乙醇分別進(jìn)行清洗棱鏡。
02 樣品測(cè)量結(jié)果
water check
2.1 免疫球蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線:
2.2 人血白蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線:
2.3 將標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)用“用戶(hù)自定義公式"編輯功
能,保存至儀器內(nèi)。
調(diào)用用戶(hù)自定義方法圖片
樣品測(cè)量過(guò)程圖片
03 結(jié)論
折光法簡(jiǎn)單,準(zhǔn)確,快速,可用于蛋白生產(chǎn)制備的中間品和終產(chǎn)品的蛋白含量指控,以指導(dǎo)生產(chǎn)及濃縮,提純等過(guò)程。
Abbemat 折光儀可實(shí)現(xiàn) 快速無(wú)損的折光率和濃度測(cè)量。所有高性能和模塊化系列折光儀在用戶(hù)級(jí)別、追蹤溯源和數(shù)據(jù)輸出防篡改等方面都符合 21 CFR Part 11 的有關(guān)規(guī)定。Abbemat T-Check 能夠精確校準(zhǔn)所有安東帕折光儀的測(cè)量棱鏡的表面溫度。
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