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咱們?cè)谶\(yùn)用ELISA試劑盒96孔板的試驗(yàn)測(cè)定的時(shí)分,常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)",也就是外周孔顯色較基地孔深。經(jīng)研討證真實(shí)溫育中的熱力學(xué)梯度也許是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體,在試驗(yàn)室的常規(guī)ELISA測(cè)定中,將板從室溫(一般在25℃分配)置于37℃溫箱,板也升溫時(shí),在外周孔與基地孔之間也許存在一熱力學(xué)梯度。因而運(yùn)用水浴或在將反響溶液參加至板孔中時(shí),將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),就可以很容易地打掃“邊緣效應(yīng)",并且可提高測(cè)定的重復(fù)性。
ELISA試劑盒還有就是在試驗(yàn)中,必定有運(yùn)用微量加樣器參加樣本的步驟。提醒留神:加樣不行太快,要防止加在孔壁上部,不行濺起和發(fā)生氣泡。ELISA試劑盒太快的話無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易致使非特異吸附。濺起會(huì)對(duì)鄰近孔發(fā)生污染。出現(xiàn)氣泡則反響液界面有區(qū)別。所以,有時(shí)分一份標(biāo)本用一樣的試劑盒這次測(cè)定為陽(yáng)性,下次測(cè)定為陰性,一般就是上述加樣及試劑的差錯(cuò)所構(gòu)成的。
ELISA試劑盒運(yùn)用時(shí)必定要根據(jù)自個(gè)的試驗(yàn)需求收購(gòu)獲取試劑盒,假設(shè)不是試劑盒,或許能提出RNA,但不能保證其質(zhì)量以及完整性。
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