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加樣的各步優(yōu)化:
A、一般情況下有三次加樣,它們分別是加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。
B、凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。
C、制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清天然凝固、收縮后即可取得。D、也可在板孔中加入稀釋液,再在其加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。
E、一般說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)本采集必修課:
1)不能檢測(cè)含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
2)標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3)細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)血清:使用不含熱原的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
5)血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
6)組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
7)保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
研域(上海)化學(xué)試劑有限公司使我們對(duì)以前一些難以檢測(cè)的生物活性物質(zhì)的測(cè)定變得輕而易舉,并且大大提高了檢測(cè)的靈敏度和特異性,并不與其它細(xì)胞因子反應(yīng),板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%,保證高品質(zhì)產(chǎn)品性能的同時(shí),也能兼顧成本,為您節(jié)約實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
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