上海研域生物實(shí)驗(yàn)室所需哪些免疫組化

免疫組化實(shí)驗(yàn)試劑

PBS緩沖液（pH7.2~7.4）：NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L.

0.01mol/L檸檬酸鹽緩沖液（CB,pH6.0,1000ml）：檸檬酸三鈉 3g,檸檬酸 0.4g.

0.5mol/L EDTA緩沖液（pH8.0）：700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O,用10 mmol/L NaOH調(diào)至pH8.0,加水至1000ml.

1mol/L的TBS緩沖液（pH8.0）：在800ml水中溶解121gTris堿，用1N的HCl調(diào)至pH8.0,加水至1000ml.

酶消化液： a、0.1%胰蛋白酶液：用0.1%CaCl2（pH7.8） 配制。 b、0.4%胃蛋白酶液：用0.1N的HCl配制。

3%甲醇-H2O2溶液：用30%H2O2和80%甲醇溶液配制。

封裱劑：

甘油和0.5mmol/L碳酸鹽緩沖液（pH9.0~9.5）等量混合

油和TBS（或PBS）配制

TBS/PBS pH9.0~9.5,適用于熒光顯微鏡標(biāo)本；pH7.0~7.4適合于光學(xué)顯微鏡標(biāo)本

免疫組化實(shí)驗(yàn)操作流程：

脫蠟和水化

脫蠟前，應(yīng)將組織芯片在室溫中放置60分鐘或60℃恒溫箱中烘烤20分鐘。

組織芯片置于二甲苯中浸泡10分鐘，更換二甲苯后再浸泡10分鐘；

無(wú)水乙醇中浸泡5分鐘

95%乙醇中浸泡5分鐘

70%乙醇中浸泡5分鐘