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研域解析:怎么挑選適宜的HA標(biāo)簽抗體?

時間:2019/8/29閱讀:1714
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HA標(biāo)簽系統(tǒng)運用一個HA流感血凝素,influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽交融到方針蛋白。HA標(biāo)簽可坐落蛋白質(zhì)的C端或N端,該系統(tǒng)已廣泛運用于多種細(xì)胞類型,相應(yīng)的HA標(biāo)簽抗體也被廣泛運用。

HA標(biāo)簽抗體能特異辨認(rèn)C末端或N末端帶有HA標(biāo)簽(HA-tagged)的交融蛋白,也可以用于檢測和HA tag交融表達(dá)蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)ding位,以及純化、定性或定量檢測HA tag交融表達(dá)蛋白等。

挑選適宜HA標(biāo)簽抗體需求考慮的要素
     
咱們在挑選一個標(biāo)簽抗體時,主要依據(jù)自己試驗運用上的需求。這里需求考慮的要素包含,HA抗體的運用檢測類型、HA抗體的克隆性及制備來源等。比方該HA抗體是否能用于免疫熒光IF的檢測?是否可以用于Western Bloting和免疫沉淀IP試驗?是否需求HRP偶聯(lián)的單克隆HA標(biāo)簽抗體?仍是一個兔來源的HA多抗更適宜?
      
一般來說,運用類型越多,在運用過程中的挑選余地就越大,而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩(wěn)定性都要優(yōu)于多克隆抗體,而多克隆。另外,抗體的效價也是考察該抗體性價比的重要方面,也即相當(dāng)于實際運用時的稀釋比率。

一個效價高的100μl HA抗體(假如其WB檢測的稀釋比率是1:5000,終究運用液相當(dāng)于500ml),要比效價低的1ml的HA抗體(假如WB檢測的稀釋比率是 1:200,終究運用液相當(dāng)于200ml)性價比更高。因此在挑選抗體的時分,不光需求考慮抗體的量,還需求考慮抗體的效價,即不同運用的主張稀釋比率。
 

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