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當(dāng)前位置:研域(上海)化學(xué)試劑有限公司>>技術(shù)文章>>上海研域生物常見細(xì)胞中的三大問題是什么
五月是綠的季節(jié)。一大片一大片的綠色正肆意地生長著、壯大著。在金色的陽光下,整個(gè)五月都被這耀眼的綠覆蓋了。心在不經(jīng)意間暢快了起來。柳樹在吐綠,樹叢在發(fā)新芽,這所有的綠,是五月變得活力四射。我司都會(huì)與您相約在一起哦!
下面我公司為您詳細(xì)談?wù)?a href="http://true-witness.com/st117401/list_1303332.html" target="_blank" style="text-decoration: underline; color: rgb(0, 0, 0);">常見細(xì)胞中常遇到的三大問題:
1、如何儲(chǔ)存和解凍常見細(xì)胞才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
將常見細(xì)胞從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
長時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清,并避免反復(fù)凍融。
我們建議細(xì)胞株應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí),請勿超過一個(gè)月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
2、常見細(xì)胞中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?
沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以,使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃,沉淀會(huì)自然消失。
3、實(shí)驗(yàn)室如何選擇適合的常見細(xì)胞?
國內(nèi)一致認(rèn)為HYCLONE的血清是比較好的,但是根據(jù)我在北美的經(jīng)歷,國外一般認(rèn)為GIBCO比HYCLONE好,所以并不是價(jià)格決定質(zhì)量,但是總的來說這兩種價(jià)格普遍偏貴,一般不是太嬌氣的細(xì)胞,國產(chǎn)的就夠用了。此外,由于國內(nèi)HYCLONE,GIBCO并沒有生產(chǎn)線,我們只能從代理商那里購買,而代理商又魚龍混雜,所以買到假貨的可能性也很大。所以,我們一般會(huì)從直銷員那里買血清,有的國外生物公司由于剛剛進(jìn)入中國,度不高,但是其實(shí)在國外已經(jīng)做得很不錯(cuò)了,如GIBCO等,他們在國內(nèi)有辦事處,我們會(huì)從那里拿,血清的品質(zhì)和GIBCO不相上下,但價(jià)格相對優(yōu)惠很多。
質(zhì)控常見細(xì)胞的制備:
1、收集新鮮的無溶血、無黃疸、無細(xì)菌污染的陽性血清。
2、56℃加熱10小時(shí)來活。
3、離心或過濾除去沉淀。
4、用10%的小牛血清或正常人血清(PBS緩沖液)將收集的血清稀釋至所需的濃度。
5、抽濾除菌,按一次使用的量分裝小安瓿,封口,20℃保存?zhèn)溆茫豢煞磸?fù)凍融,被檢物要求檢出的水平常被認(rèn)為是質(zhì)控血清應(yīng)選擇的水平。
6、標(biāo)定含量,20-30次測定結(jié)果刪除>±2SD數(shù)據(jù)的均值作為靶值,并與已知定值血清對比測定。
我們公司產(chǎn)品種類繁多,價(jià)格合理,品質(zhì)有保證,交貨時(shí)間的快速,售前售后服務(wù)的及時(shí)等等,常見細(xì)胞正式因?yàn)檫@些才保證了我們向您提供的專業(yè)優(yōu)質(zhì)的的服務(wù)!只有不斷學(xué)習(xí)與實(shí)驗(yàn)才能逐漸積累經(jīng)驗(yàn),做出更好的實(shí)驗(yàn)效果。
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