C3試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知C3濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將C3和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中C3的濃度呈比例關(guān)系。

小鼠補(bǔ)體C3ELISA試劑盒安徽，六安

試劑盒內(nèi)容及其配制

試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制

96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型

塑料膜板蓋1塊半塊即用型

標(biāo)準(zhǔn)品：8.0g/L1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進(jìn)行稀稀

空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型

生物素標(biāo)記的抗C3抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型

親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型

洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進(jìn)行稀釋

底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型

底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型

終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型

自備材料

1．蒸餾水。

2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3．振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性

1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2．實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項(xiàng)

1．試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

2．實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

3．不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6．洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

7．底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

8．加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

9．按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法

1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準(zhǔn)備

1．標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：

8.0 g/L（6號標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。

4.0 g/L（5號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.0 g/L（4號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.0 g/L（3號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

0.5 g/L（2號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

0.25 g/L（1號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

0 g/L（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

操作步驟

1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。

2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

3．加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。

4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。

8．取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。

9．在450nm波長處測定各孔的OD值。

建議使用的實(shí)驗(yàn)方案

標(biāo)準(zhǔn)品濃度（g/L）

A8.08.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品

B4.04.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品

C2.02.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品

D1.01.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品

E0.50.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品

F0.250.25樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品

G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品

H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品

局限

6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。

試劑盒性能

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性：不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

結(jié) 果判斷與分析

1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的C3標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的C3含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

3、檢測值范圍：0-8.0g/L

4、敏感度： 0.01 g/L

DB0363-250mgdGMP 2’-Deoxyguanosine 5’-monophosphate disodium salt 2’-脫氧鳥苷-5’-一磷酸二鈉鹽[33430-61-4]

DB0363-1gdGMP 2’-Deoxyguanosine 5’-monophosphate disodium salt 2’-脫氧鳥苷-5’-一磷酸二鈉鹽[33430-61-4]

DB7853-250mg2′-Deoxyinosine 5′-monophosphate sodium salt 2′-脫氧肌酐-5′-磷酸鈉[14999-52-1]

D6587-1mgDeoxynivalenol 脫氧雪腐鐮刀菌烯醇[51481-10-8]

DD0152-5g2-Deoxy-D-ribose 2-脫氧-D-核糖[533-67-5]

DD0152-25g2-Deoxy-D-ribose 2-脫氧-D-核糖[533-67-5]

D2851-5g2-Deoxy-L-ribose 2-脫氧-L-核糖[18546-37-7]

D2851-25g2-Deoxy-L-ribose 2-脫氧-L-核糖[18546-37-7]

DB0049-1g2’-Deoxythymidine 2’-脫氧胸苷[50-89-5]

DB0049-5g2’-Deoxythymidine 2’-脫氧胸苷[50-89-5]

DB0366-50mgdTDP 2'-Deoxythymidine-5'-diphosphate trisodium salt 2’-脫氧脫氧胸苷5’二磷酸三鈉鹽[95648-78-5]

DB0366-250mgdTDP 2'-Deoxythymidine-5'-diphosphate trisodium salt 2’-脫氧脫氧胸苷5’二磷酸三鈉鹽[95648-78-5]

DB0367-250mgdTMP 2’-Deoxythymidine-5’-monophosphate disodium salt 2’-脫氧胸苷-5’-一磷酸二鈉鹽[33430-62-5]

DB0367-1gdTMP 2’-Deoxythymidine-5’-monophosphate disodium salt 2’-脫氧胸苷-5’-一磷酸二鈉鹽[33430-62-5]

DD0046T-50mgdTTP 2'-Deoxythymidine-5'-triphosphate, trisodium salt 5’-三磷酸– 2-脫氧胸苷三鈉鹽[18423-43-3]

DB0369-1g2’-Deoxyuridine 2’-脫氧尿苷[951-78-0]

DB0154-100mlDEPC 焦碳酸二乙酯[1609-47-8]

DE174-5mlDEPC 焦碳酸二乙酯[1609-47-8]

DE174-25mlDEPC 焦碳酸二乙酯[1609-47-8]

D2483-100gDevarda’s alloy 第威德合金[8049-11-4]

DB0369-5g2’-Deoxyuridine 2’-脫氧尿苷[951-78-0]

E6320-25gEthyl eosin 乙基曙紅[6359-05-3]

D0491-250mg2’-Deoxyuridine 2’-脫氧尿苷[951-78-0]

D0491-5g2’-Deoxyuridine 2’-脫氧尿苷[951-78-0]

DB0370-250mgdUMP 2’-Deoxyuridine-5’-monophosphate 2’- 脫氧尿苷-5’-磷酸二鈉鹽[42155-08-8]

DB0370-1gdUMP 2’-Deoxyuridine-5’-monophosphate 2’- 脫氧尿苷-5’-磷酸二鈉鹽[42155-08-8]

現(xiàn)貨小鼠補(bǔ)體C3ELISA試劑盒安徽，六安

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