氨磺樂靈（Oryzalin）和氟樂靈（Trifluralin）-無毒染色體加倍劑、秋水仙堿替代品

常見染色體加倍劑：

秋水仙堿（olchicine）氨磺樂靈（oryzalin）和氟樂靈 （trifluralin）這類有絲分裂抑制劑在細胞有絲分裂過程中可以與微觀蛋白二聚體結(jié)合，從而阻止微管進而紡錘絲的形成（Peterson et al., 2003） 。秋水仙堿是zui早用于染色體加倍的試劑，同時也是zui常用的，然而它具有巨毒性并且在使用、運輸上多有限制。氨磺樂靈、氟樂靈作為秋水仙堿的替代品，具有與之類似的染色體加倍能力，并且與秋水仙堿相比，具有無毒的特性。

有報道氨磺樂靈處理梨、蘋果、獼猴桃、北美杜鵑、香蕉，均能有效誘導(dǎo)染色體加倍，并且可以有效提高外植體的存活率。如，5 – 30 μM 濃度氨磺樂靈處理單倍體蘋果小苗后染色體加倍效果要比0.25 – 1.25 mM秋水仙堿的處理效果更好；而10 – 20 μM 濃度氨磺樂靈處理4個香蕉栽培種均可以有效誘導(dǎo)加倍并且顯著提高微芽數(shù)目，如果使用秋水仙堿的話，需要 125 – 200 倍的濃度來誘導(dǎo)產(chǎn)生染色體加倍的效果，并且還對生苗具有毒副作用。

氟樂靈主要用于蕓苔屬組織培養(yǎng)，在組織培養(yǎng)前18個小時用氟樂靈處理甘藍型油菜（Brassica napus）小孢子可以誘導(dǎo)單倍體胚加倍，并且這些加倍的胚可以正常地發(fā)育和萌發(fā)（Zhao and Simmonds 1995）。此外處理卷心菜（Brassica oleracea var. capitata L.）、小麥小孢子培養(yǎng)物，以及月季分生組織均能有效誘導(dǎo)多倍體化。

溶液配制方法：

氨磺樂靈 （Oryzalin 貨號 O630） 是純度為97.5%的橘黃色粉末，分子量是346.36，不易溶于水，但是極易溶于 DMSO，形成帶淡黃色的澄清溶液 。氨磺樂靈的DMSO 溶液應(yīng)該保存于冰箱中。注意DMSO 在18.5°C 會“結(jié)冰”。 DMSO 可以增強氨磺樂靈對植物組織的穿透能力，同樣對皮膚組織也有穿透性，因此當操作DMSO時必須佩帶手套。在配置氨磺樂靈液體母液的時候，首先要用DMSO 溶解，然后再用水定容，不論母液是如何配置的，切記DMSO 在組織培養(yǎng)基中的終濃度不得高于1 ml/L. 這一點已經(jīng)被多年植物組織培養(yǎng)實踐所驗證。以下是配置方法：配置濃度為10 mM 溶液時，先稱取氨磺樂靈 并溶于數(shù)ml 的DMSO.將這些液體分點滴加到 90 ml 水中并不停攪拌，在這一步由于氨磺樂靈 在水中溶解度比較低，約2.6mg/L,所以當加入到水中時必須快速分散開，以免結(jié)晶。 zui后加水定容至100 ml。如果需要獲得更高/更低濃度的溶液的話，可以通過調(diào)整溶液體積獲得。關(guān)于該溶液的長期保存穩(wěn)定性目前還沒有任何記錄，因此建議短期保存的話可以在冰箱4°保存。

氟樂靈（trifluralin貨號：T828） 是純度為98%的橘黃色粉末。分子量為335.28。同樣它溶于DMSO但是不溶于水。 溶液的配制、外觀、保存均與氨磺樂靈相同。