酶聯(lián)免疫分析（EIA）用親和力抗體檢測(cè)蛋白是一種很特殊的方法。用酶標(biāo)親和力抗體和敏感底物一起用免疫組化的方法來(lái)檢測(cè)與膜蛋白綁定的樣本。隨著蛋白結(jié)合在膜上后，用一抗選擇性的和蛋白結(jié)合。通過(guò)特定單抗和血清樣本的篩選，相應(yīng)蛋白會(huì)結(jié)合到膜上。與堿性磷酸酶相偶聯(lián)的酶標(biāo)二抗直接作用于此部位。AP的底物用的是5-bromo-4-chloro-3-indolyl- phosphate/nitroblue tetrazolium （BCIP/NBT）。堿性磷酸酶可以促進(jìn)BCIP的去磷酸化，從而在抗體作用部位形成不溶于水的紫色沉淀物。當(dāng)曝光時(shí)顏色會(huì)有些許衰退。

蛋白免疫印跡檢測(cè)試劑盒包含酶標(biāo)記的具有親和性的純化抗體來(lái)檢測(cè)小鼠，兔或者血清樣本。使用中，酶標(biāo)二抗（試劑盒提供）還可以在沒有中介抗體的情況下直接檢測(cè)小鼠，兔的膜蛋白。此試劑盒無(wú)需其他緩沖液。

隨著實(shí)驗(yàn)進(jìn)行，目的蛋白一定會(huì)被固定在檢測(cè)膜上。硝化纖維素，聚乙二烯二氟化物（PDVP）和聚酰胺纖維膜都可以應(yīng)于于此試劑盒。對(duì)斑點(diǎn)印跡實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)，蛋白以斑點(diǎn)形式出現(xiàn)并被固定到膜上；對(duì)免疫印跡實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)，蛋白通過(guò)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分來(lái)并通過(guò)電轉(zhuǎn)儀轉(zhuǎn)移到膜上。

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