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北京西美杰科技有限公司
主營產(chǎn)品： 生物學(xué)檢測試劑盒,化學(xué)試劑,蛋白質(zhì)氧化損傷,抗原抗體 |
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- 更新時間：
- 2024-10-16 21:00:07
- 有效期：
- 2024年10月16日--2025年4月16日
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轉(zhuǎn)染江湖風(fēng)起云涌，群雄紛爭不斷。近年來，病毒載體在基因/細(xì)胞治療領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用，讓市場對病毒包裝的質(zhì)量和效率要求日益提升。Mirus經(jīng)歷兩年，專攻AAV與Lentivirus病毒載體包裝制備的新產(chǎn)品TransIT®-VirusGEN™ Transfection Reagent終于問世，與各路轉(zhuǎn)染高手過招，精彩紛呈。欲知詳情，且看下文分解。
1.TransIT®-VirusGEN™招式解析
TransIT®-VirusGEN™ 依然采用Mirus多聚物轉(zhuǎn)染方法，無動物源成分，主要針對腺相關(guān)病毒（AAV）包裝而研發(fā)，對部分慢病毒（Lentivirus）包裝系統(tǒng)也有很強(qiáng)優(yōu)勢，這兩種病毒都需要HEK 293細(xì)胞系生產(chǎn)，所以該轉(zhuǎn)染試劑適用于包括懸浮和貼壁的各種類型HEK 293細(xì)胞系，能大幅提高轉(zhuǎn)染效率和病毒產(chǎn)量，從而在有限的時間和資源里實現(xiàn)zui大收獲。
2.AAV包裝實戰(zhàn)分析
在相同培養(yǎng)條件下，用不同轉(zhuǎn)染試劑分別在懸浮的293-F和貼壁的293T/17兩種細(xì)胞系共轉(zhuǎn)pAAV-hrGFP, pAAV-RC, and pAAV-Helper三種質(zhì)粒包裝AAV重組病毒，然后利用GFP標(biāo)簽在HT1080細(xì)胞上檢測AAV滴度。結(jié)果顯示，不論是懸浮還是貼壁293細(xì)胞系，采用TransIT®-VirusGEN™轉(zhuǎn)染產(chǎn)出的AAV滴度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他幾款轉(zhuǎn)染試劑。
3.慢病毒包裝實戰(zhàn)分析
在相同培養(yǎng)條件下，用不同轉(zhuǎn)染試劑分別在懸浮的293-F和貼壁的293T/17兩種細(xì)胞系轉(zhuǎn)染pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP™ 穿梭質(zhì)粒 和慢病毒包裝質(zhì)粒Mix powered（MISSION®）包裝Lentivirus重組病毒，然后利用GFP標(biāo)簽在293T/17細(xì)胞上檢測Lentivirus滴度。結(jié)果顯示，不論是懸浮還是貼壁293細(xì)胞系，采用TransIT®-VirusGEN™轉(zhuǎn)染產(chǎn)出的重組慢病毒滴度都遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他幾款轉(zhuǎn)染試劑。
4.轉(zhuǎn)染體系放大可提高AAV產(chǎn)量
采用TransIT®-VirusGEN™在6孔板和250mL培養(yǎng)瓶中轉(zhuǎn)染293-F懸浮細(xì)胞系包裝AAV，在6孔板和10cm平皿中轉(zhuǎn)染293T/17貼壁細(xì)胞系包裝AAV，兩組實驗在不同大小培養(yǎng)體系產(chǎn)出的重組病毒滴度比較結(jié)果顯示，當(dāng)體系從6孔板→250mL培養(yǎng)瓶（或6孔板→10cm平皿）放大后，病毒產(chǎn)量也會相應(yīng)提升20%左右，表明該轉(zhuǎn)染試劑適用于包裝重組病毒的工藝放大。
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