在腺相關(guān)病毒的應(yīng)用過程中，我們經(jīng)常需要獲得病毒液的病毒含量或者腺相關(guān)病毒的滴度數(shù)據(jù)。傳統(tǒng)的方案是使用 DNA點(diǎn)雜交或其他類似方法來測量腺相關(guān)病毒感染滴度，但是這種傳統(tǒng)的方法實(shí)驗(yàn)周期較長，操作繁瑣。對于已獲得了高純度AAV顆粒的檢測，使用 OD260nm處光吸收度數(shù)值來衡量AAV的病毒顆粒含量不失為一種更便捷的方案，遺憾的是，這種方法不適用于未純化的病毒顆粒，因?yàn)槠渌碾s質(zhì)會干擾 260nm處的吸收度。另外，采用免疫學(xué)的辦法，使用與AAV病毒顆粒結(jié)合的抗體來檢測腺相關(guān)病毒含量也有被使用，但是很顯然，這種方法將會檢測所有 AAV病毒，包括不含有基因組DNA的包裝顆粒。

Cell Biolabs的QuickTiter? AAV Quantitation Kit試劑盒（目錄號：VPK-145）很好的解決了上述問題，該試劑盒包括試劑A、試劑B、捕獲Matrix、洗脫液、溶液C、Dye染料以及AAV DNA標(biāo)準(zhǔn)物。本腺相關(guān)病毒定量試劑盒通過檢測腺病毒DNA含量來測定其病毒含量。該腺相關(guān)病毒定量試劑盒的工作步驟是首先降解懸液里的核酸成分，然后使用Matrix膠有效結(jié)合腺相關(guān)病毒顆粒，從而分離出雜質(zhì)蛋白及蛋白復(fù)合物，洗脫下AAV顆粒后進(jìn)行變性，隨后用染料對核酸進(jìn)行染色。

由于采用了技術(shù)的捕獲Matrix膠，不但能專一性的結(jié)合腺相關(guān)病毒顆粒，因此能有效的提高檢測效度；而且可以用于未純化的AAV病毒液，因此可定量已經(jīng)純化的AAV病毒以及未純化的AAV病毒。經(jīng)過相關(guān)步驟后，通過480/520 nm濾鏡熒光儀下讀取數(shù)據(jù)，對照AAV DNA標(biāo)準(zhǔn)曲線得出AAV滴度。該試劑盒檢測靈敏，對于已經(jīng)純化的AAV DNA，可以在2小時內(nèi)獲得數(shù)據(jù)，可檢測1×10⁹GC/ml的AAV；對于未純化的DNA，需要使用Kit提供的提純試劑純化再測量，大概在3-4小時左右完成，可檢出5×10¹⁰GC/ml腺相關(guān)病毒。該試劑盒能從無輔助病毒的AAV病毒液內(nèi)完成20次檢測。

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QuickTiter?腺相關(guān)病毒定量試劑盒