凱氏定氮儀測定面膜原液的蛋白含量
重組膠原蛋白敷料貼,該產(chǎn)品含重組人源化膠原蛋白。用于提供皮膚過敏、激光、光子術(shù)后等淺表或非慢性創(chuàng)面的愈合環(huán)境。
面膜原液
SKD-1000全自動凱氏定氮儀,SKD-20S2紅外石英消化爐,分析天平等
硫酸(分析純),20g/L 硼酸溶液,溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑,400g/L 氫氧化鈉溶液,硫酸銅硫酸鉀混合催化劑,0.02mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液。
取5g(精確至0.1mg)左右的樣品,加硫酸銅硫酸鉀混合催化劑5g,再加濃硫酸10ml。
空白放相同的催化劑和濃硫酸。
將加完樣品和試劑的消化管放置于消化爐上,蓋好排廢裝置,設(shè)定紅外石英消化爐參數(shù)如表 1 所示
表1 消化爐參數(shù)設(shè)置
|              程序段  |                          溫度℃  |                          時間min  |         
|              程序段1  |                          180  |                          5  |         
|              程序段2  |                          250  |                          5  |         
|              程序段3  |                          350  |                          10  |         
|              程序段4  |                          410  |                          90  |         
消解完成后,待消化管冷卻至室溫后取下備用。檢查定氮儀各試劑是否充足,同時做儀器空白,待儀器空白穩(wěn)定后,可將消解好的樣品上機測試。定氮儀參數(shù)設(shè)置如表 2 所示:
表2 定氮儀參數(shù)設(shè)置
|              稀釋液  |                          堿  |                          蒸餾時間  |                          蒸餾功率  |                          蛋白系數(shù)  |                          標(biāo)準(zhǔn)酸  |                          標(biāo)準(zhǔn)酸濃度  |                          樣品重量  |         
|              40ml  |                          45ml  |                          6分鐘  |                          100%  |                          6.25  |                          鹽酸  |                          0.02026mol/L  |                          g  |         
實驗選取的蛋黃軟磷脂樣品經(jīng)消解、蒸餾、滴定,得到實驗結(jié)果如表 3 所示:
表3 實驗結(jié)果
|              樣品名稱  |                          測量次數(shù)  |                          重量g  |                          測量值%  |                          平均值%  |                          測量重復(fù)性RSD(≤0.5%)  |                          標(biāo)準(zhǔn)值%  |         
|              面膜原液樣品1  |                          1  |                          5.62380  |                          0.13971  |                          0.139315  |                          0.28%  |                          /  |         
|              2  |                          5.59840  |                          0.13892  |         
本次測試的面膜原液樣品1蛋白含量為0.139315%,RSD值為0.28%,測試結(jié)果低于凱氏定氮儀國標(biāo)要求RSD≤0.5%。
[1] 《中國藥典》(2020 版):通則 0704.
[2] GBT 33862-2017 全(半)自動凱氏定氮儀[S].
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