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什么是蛋白酶K,有哪些作用和用途?

時間:2021/3/25閱讀:2933
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一、什么是蛋白酶K?
蛋白酶K(Proteinase K)是一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關(guān)的絲氨酸蛋白酶,基因序列來源于白色念球菌白色念球菌(Tritirachium album limber),具有很高的比活性。用于mRNA和DNA與蛋白質(zhì)的分離。

二、它有什么作用?
蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理,它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用,以增加探針與靶核酸結(jié)合的機會提高雜交信號。但蛋白酶K的濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時都會對細胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞,導(dǎo)致組織切片的脫落細胞核的消失,從而影響雜交結(jié)果。EDTA緩沖液可以替代蛋白酶K的作用解決上述出現(xiàn)的問題,并能達到理想的染色效果。


三、他的用途及應(yīng)用
1.蛋白酶K可用于質(zhì)粒或基因組DNA、RNA的分離,是DNA提取的重要試劑;
2.對于xg病毒亦可裂解病毒釋放核酸,消除核酸分解酶(RNase)以防止病毒的RNA降解。并且可以滅活病毒,讓病毒的蛋白變性,失去活性而“死掉”,不再有傳染性,提高運輸和檢測階段的安全性;
3.同時蛋白酶K也能夠應(yīng)用到皮革工業(yè)、肉類嫩化、滅活生活以及工業(yè)用水中的細菌,優(yōu)點是消毒劑本身無害,而且不產(chǎn)生有害消毒產(chǎn)物,所以這是一種高效環(huán)保的方法。

四、如何存放
保存:保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融,有效保證12月。
使用方法:孵育溫度為55至65℃,理想孵育溫度為58℃,孵育時間為15分鐘至48小時;理想孵育時間為2小時。
 

貨號

名稱

品牌

規(guī)格/純度

AS70874

蛋白酶K

AMEKO

30u/mg

RC21066

蛋白酶K溶液

AMEKO

20mg/ml

RC21328

蛋白酶K緩沖液

AMEKO

100mL

1245680100

蛋白酶K

Merck

40u/mg

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