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干粉培養(yǎng)基是將配制好的培養(yǎng)基進行脫水處理,這樣便于保存及銷售。
干粉培養(yǎng)基的優(yōu)缺點:
優(yōu)點在于便于運輸、可以長期儲存,不過需要使用者自行配置方可以使用, 配制時需要制備細胞培養(yǎng)用的純水, 有時也存在溶解性不好的問題。
缺點在于批次間的重復性不太好。
干粉培養(yǎng)基的配置:
1. 在一個盡可能接近總體積的容器中加入比預期培養(yǎng)基總體積少5%的雙蒸水。
2. 在室溫(20℃到30℃)的水中加入干粉培養(yǎng)基,輕輕攪拌,不要加熱。
3. 水洗包裝袋的內(nèi)部,轉(zhuǎn)移全部的痕量干粉到容器內(nèi)。
4. 加NaHCO3到培養(yǎng)基中。
5. 用雙蒸水稀釋到想要的體積,攪拌溶解。注意不要過分攪拌。
6. 通過緩慢攪拌加入1N NaOH 或1N HCL調(diào)節(jié)pH值,由于pH值在過濾時會上升0.1到0.3,因而調(diào)節(jié)pH值使它比最終想要的pH值低0.2到0.3。培養(yǎng)基在過濾前要保持密封。
干粉培養(yǎng)基的注意事項:
1. 干粉不包含的成分,常見的有NaHCO3、谷氨酰胺、丙酮酸鈉、HEPES等。這些成分有些是必須添加的,如NaHCO3、谷氨酰胺,有些根據(jù)實驗需要決定。
2. 配制是要保證充分溶解,NaHCO3、谷氨酰胺等物質(zhì)都要等培養(yǎng)基*溶解之后才能添加。
3. 配制所用的水應是三蒸水,離子濃度很低。
4. 所用器皿應嚴格消毒。
5. 配制好的培養(yǎng)基應馬上過濾,無菌保存于4度。
6. 液體培養(yǎng)基主要是為了科研工作的方便而設計的培養(yǎng)基,它是一種滅菌后保證無菌的溶液,必要時可制成無內(nèi)毒素等的溶液,可節(jié)省科研人員的工作量。
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