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凱氏定氮法

時(shí)間：2011/12/23閱讀：2014

凱氏定氮法

凱氏定氮法是測(cè)定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下，用濃硫酸消化樣品將有機(jī)氮都轉(zhuǎn)變成無(wú)機(jī)銨鹽，然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨，隨水蒸氣餾出并為過(guò)量的酸液吸收，再以標(biāo)準(zhǔn)堿滴定，就可計(jì)算出樣品中的氮量。由于蛋白質(zhì)含氮量比較恒定，可由其氮量計(jì)算蛋白質(zhì)含量，故此法是經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法。

凱氏定氮法是基于待測(cè)天然含氮有機(jī)物與濃硫酸共熱時(shí)，會(huì)被氧化成為二氧化碳和水，

然后堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后再以硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù)，即為蛋白質(zhì)含量。　　

1. 有機(jī)物中的胺根在強(qiáng)熱和CuSO₄，濃H₂SO₄ 作用下，硝化生成（NH₄）₂SO₄

反應(yīng)式為：2NH₂+H₂S04+2H＝（NH₄）₂S0₄ （其中CuSO₄做催化劑）　　

2.在凱氏定氮器中與堿作用，通過(guò)蒸餾釋放出NH3 ，收集于H3BO3 溶液中　　

反應(yīng)式為：（NH₄）₂SO₄+2NaOH＝2NH₃+2H₂O+Na₂SO₄ 　　

2NH₃+4H₃BO₃＝（NH₄）2B₄O₇+5H₂O 　　

3. 用已知濃度的H₂SO₄（或HCI）標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)HCI消耗的量計(jì)算出氮的含量，然后乘以相應(yīng)的換算因子，既得蛋白質(zhì)的含量　　

反應(yīng)式為：（NH₄）2B₄O₇+H₂SO₄+5H₂O＝（NH₄）₂SO₄+4H₃BO₃ 　　

（NH₄）₂B₄O₇+2HCl+5H₂O＝2NH₄Cl+4H₃BO₃