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在醫(yī)學生物研究中,免疫熒光檢測等需用到細胞爬片。細胞爬片是什么?其名為爬片,外文名稱為Round Coverslip, 用于各類細胞培養(yǎng)板中,讓細胞在爬片上生長,后續(xù)實驗可直接使用,避免了細胞從培養(yǎng)板轉(zhuǎn)移到載玻片上的損傷。細胞爬片采用玻璃片,經(jīng)滅菌,TC等處理后制作而成,可促進細胞在玻片上貼壁生長與形態(tài)伸展,在后期免疫組化、免疫熒光、原位雜交等處理過中也不易脫片。
細胞爬片特點以及規(guī)格:
- 無污染,免清洗,節(jié)省實驗員的時間。
- γ射線滅菌,無熱源、無DNA酶、無RNA酶。
- 化學穩(wěn)定性好,耐受實驗室常用溶劑。
- 機械切割,邊緣整齊,取用安全方便。
細胞爬片操作注意事項:使用細胞爬片時(比如在六孔板中放入爬片,六孔板的孔底面積往往會比爬片面積多出一部分,加細胞懸液時常常就是細胞鋪滿整個孔底,有時細胞生長邊集現(xiàn)象,就是靠近壁邊緣密度要高些,這樣處于中央玻片上爬的細胞數(shù)量就可能相對較少)
比較好的做法是將玻片放入孔板的孔內(nèi)后,加細胞懸液時只滴到玻片上,一直滴到液體布滿整個玻片又不會溢出玻片邊緣(因為液體表面張力作用可以很容易做到這一點!),放在培養(yǎng)箱里,等細胞貼壁后,取出,再滴加培養(yǎng)基布滿整個孔底,繼續(xù)培養(yǎng),這樣玻片上的細胞生長的密度就會很集中。
保存方式:經(jīng)TC處理的細胞爬片只需RT保存,在超凈臺無菌的狀態(tài)下打開包裝;未用完的爬片按原先包裝方式再包裝起來即可。
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