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中級(jí)會(huì)員 | 第17年

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免疫組化準(zhǔn)備

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免疫組化準(zhǔn)備

zui重要的是選擇好一抗、二抗或者還有三抗，注意抗體的特異性、效價(jià)和交叉反應(yīng)，用單抗。
其他常用試劑有：
1、0.01M（pH7.4）的磷酸鹽緩沖生理鹽水（PBS），稀釋抗體和洗片子用；
2、清潔液、純水，洗玻片用
3、多聚賴氨酸處理載玻片，防止脫片
4、固定液：4%多聚甲醛或冷丙酮等；
5、15%~30%蔗糖，組織脫水用；
6、梯度酒精脫水、二甲苯透明、石蠟包埋，或者OCT包埋做冰凍切片；
7、抗原修復(fù)液：枸櫞酸緩沖液（pH6.0）；
8、活化劑：EDTA或者Triton X-100；
9、1%~10%牛血清清蛋白（BSA）封閉液；
10、H2O2，滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶；
11、顯色液：根據(jù)你做的酶來(lái)選擇，如果是HRP就用DAB，如果是AKP，就用NBT/BCIP，免疫熒光則不需要；
12、50%緩沖甘油封片液。

 

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