軍團(tuán)菌抗體ELISA檢測(cè)試劑盒
(美國DRG*:貨號(hào),EIA2814;規(guī)格,96T)
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1、適用范圍
作為一種輔助手段用于定性檢測(cè)人血清中軍團(tuán)菌總抗,屬于體外診斷試劑。在美國僅用于科研。
2、實(shí)驗(yàn)原理
微孔板中包被著激活的軍團(tuán)菌抗原,實(shí)驗(yàn)過程包含三步
- 待測(cè)血清在包被板中的反應(yīng)。血清中特異性抗體可與包被板中的抗 原結(jié)合,洗板除去未結(jié)合樣品。
- 加入酶聯(lián)羊抗人IgA/M/G,酶聯(lián)物可與上步中結(jié)合到包被板的抗體反應(yīng),洗板。
- 底物液顯色反應(yīng),通過顏色變化,可判斷其抗體的含量。
3、試劑組成
名稱 | 規(guī)格 |
微孔條 | 包被軍團(tuán)菌抗原(1-6組) 12 X 8孔 |
酶聯(lián)物 | 1×15ml/瓶標(biāo)記有HRP羊抗人軍團(tuán)菌IgG/M/A抗體白色蓋子 |
陽性質(zhì)控 | 1×0.35ml/瓶 紅色蓋子 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 1×0.5ml/瓶 藍(lán)色蓋子 |
陰性質(zhì)控 | 1×0.35ml/瓶 綠色蓋子 |
樣品稀釋液 | 1×30ml/瓶 |
底物顯色液 | 1×15ml/瓶含TMB |
濃縮洗滌液(10X) | 1×100ml/瓶 |
終止液 | 1×15ml/瓶1M的硫酸 |
4、試劑儲(chǔ)存保存于2-8℃,稀釋后的洗滌液可在室溫保存一周
5、樣品收集和準(zhǔn)備靜脈穿刺取血,避免交叉感染,禁止使用溶血,污染血液樣品。血液樣品在室溫下不得超過8小時(shí),2-8℃保存不得超過48小時(shí),如需保存更長時(shí)間需在-20℃或者更低的溫度下凍存。
6、實(shí)驗(yàn)所需材料儀器但本試劑盒未提供酶標(biāo)儀
微量移液管10ul和200ul
多通道移液器(50-200ul)
去離子水
塑料洗瓶
加樣槍頭
量筒
紙巾
7、實(shí)驗(yàn)步驟(1)、將試劑盒內(nèi)各成份平衡至室溫。
(2)、確定所需的微孔條將其固定在板架上。(1個(gè)空白孔,1個(gè)陰性質(zhì)控孔,3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個(gè)陽性質(zhì)控孔)
(3)、按照1:21對(duì)樣品,陰性質(zhì)控,標(biāo)準(zhǔn),陽性質(zhì)控進(jìn)行稀釋(10ml血清+200ml的樣品稀釋液)
(4)、加入100ul樣品稀釋液于A1孔作為空白孔,每孔分別加入100ul稀釋后
的質(zhì)控,標(biāo)準(zhǔn)及樣品。
(6)、室溫(20-25℃)反應(yīng)25±5分鐘
(7)、洗板5次
(8)、每孔加入100ul的酶聯(lián)物
(9)、室溫(20-25℃)反應(yīng)25±5分鐘
(10)、洗板5次
(11)、每孔加入100ul的底物液
(12)、室溫下反應(yīng)10-15分鐘
(13)、每孔加入50ul終止液
(14)、30分鐘內(nèi)酶標(biāo)儀讀數(shù)
觀察結(jié)果,或者在450nm/620-650nm處讀數(shù)
注意:洗滌時(shí)要反復(fù)洗滌五次8、結(jié)果說明CUTOFF OD值=參比品OD x 相關(guān)因子(CF)
CF值在每個(gè)試劑盒上注明。
陰性樣品:樣本OD/CUTOFF OD ≤ 0.90
灰色區(qū)域:0.91<樣本OD/CUTOFF OD<1.09
陽性樣品:樣本OD/CUTOFF OD≥ 1.10
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