DRNAzolTM血清病毒DNA/RNA提取試劑盒使用說明書
本試劑盒由裂解液、蛋白沉淀液組成。可同時從血清中提取病毒DNA和RNA基因組。整個提取過程不超過45分鐘。提取過程包括:1裂解血清中的病毒顆粒。2鹽析沉淀蛋白,分離DNA和RNA。3異丙醇沉淀脫鹽并濃縮。4 70%乙醇清洗,晾干并用DNA和RNA溶解液溶解。裂解液中含有抑制DNA酶和RNA酶的成分,在加熱(65°C)狀態(tài)下,可保證完整的病毒DNA和RNA的充分裂解釋放,異丙醇沉淀時,罕見渾濁的蛋白質(zhì)雜質(zhì)的共沉淀。提取血清DNA和RNA可用于PCR擴(kuò)增、內(nèi)切酶消化以及膜雜交等。
一、 試劑盒組成(本試劑盒提供的組份, 至少可提取100份100ul血清樣本的DNA,每種組份均有足夠的富余量)
1. 復(fù)合裂解液:20ml´1瓶。
2. 蛋白沉淀液:20ml´1瓶。
3. 操作說明書一份。
二、 本試劑盒未提供,須用戶自備的試劑為:DEPC處理的超純水,DEPC處理的EP離心管及家養(yǎng)槍頭,異丙醇,70%乙醇(國產(chǎn)分析純)。
三、 血清病毒DNA和RNA提取操作準(zhǔn)備:
1. 樣本要求:用于提取的血清樣本,樣本在-20°C存放一周以內(nèi),避免反復(fù)凍融。4°C存放3天以內(nèi),均能純化出高質(zhì)量的DNA和RNA。-80°C條件下,樣本至少可存放一年。
2. 血清需求量:根據(jù)需要,本試劑盒每200ul裂解液,可提取20-100ul血清病毒DNA和RNA。如果按照每份提取血清100ul來計算,總共可以提取100份血清,提取試劑各組份用量與血清提取量的對應(yīng)關(guān)系見下面表格。