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白喉抗體檢測試劑盒（測總抗）

白喉是由白喉棒狀桿菌引起的急性傳染病，也是一種古老的傳染病。20世紀(jì)30年代，白喉類毒素主動(dòng)免疫逐漸開展起來，使白喉的發(fā)病率顯著下降，1978年WTO開始推行擴(kuò)大計(jì)劃免疫，全球白喉發(fā)病率進(jìn)一步下降。目前，有些國家如美國已無白喉病例，中國近幾年也未發(fā)現(xiàn)白喉病例，但在部分國家如非洲一些國家以及中國周邊一些國家還存在白喉病例及爆發(fā)、流行，仍有國外輸入以及國內(nèi)疫情復(fù)燃的可能，了解并加強(qiáng)白喉的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)十分必要。

【試劑準(zhǔn)備】

將所有的試劑和樣本平衡至室溫(20-25°C)，并在開始測試運(yùn)行前進(jìn)行混合是非常重要的！

洗滌液

用蒸餾水根據(jù)1+19稀釋洗滌濃縮液，例如，10 mL洗滌濃縮液+190mL蒸餾水混合。稀釋的洗滌液在室溫下（20-25℃）可保存5天，如果在濃縮液中出現(xiàn)晶體，則將溶液加熱至37°C，例如在水浴中。稀釋前攪拌均勻。

底物液

試劑為即用型，不需要稀釋。必須儲(chǔ)存在2-8°C，避光。溶液應(yīng)該是無色的，或者可以有一個(gè)輕微的藍(lán)色色調(diào)。如果基質(zhì)變成藍(lán)色，它可能已經(jīng)被污染了，應(yīng)該被扔掉。

【樣本采集和制備】

使用人血清或血漿（檸檬酸、肝素）樣本。如果在樣本采集后5天內(nèi)進(jìn)行檢測，樣本應(yīng)保持在2-8°C；否則應(yīng)分裝并深度冷凍保存(-70至-20°C)。如果樣本是冷凍保存的，在檢測前將解凍的樣本混合。避免反復(fù)凍結(jié)和解凍。不建議對樣本進(jìn)行熱失活。

樣本稀釋

檢測前，所有樣本應(yīng)用IgG樣本稀釋緩沖液稀釋1+100。將10µL樣本和1 mL IgG樣本稀釋緩沖液加入試管中，渦旋混勻。

檢測步驟

1）加100µL標(biāo)準(zhǔn)品或質(zhì)控品和稀釋的樣本至相應(yīng)的微孔中，保留A1為空白對照。

2）用提供的封板紙封板。

3）37± 1 °C孵育1小時(shí)± 5 分鐘。

4）棄掉微孔中的內(nèi)容物，用稀釋的洗滌液沖洗孔3次(每次每孔300µL)。洗滌和吸入的時(shí)間間隔應(yīng)>5s。在吸收性紙上用力擊打微孔板，以去除殘留的液滴。

5）加100µL酶聯(lián)物至每個(gè)微孔中，除了空白孔。

6）室溫下（20-25℃）避光孵育30分鐘。

7）重復(fù)洗滌步驟。

8）加100µL底物液至每個(gè)微孔中。

9）在黑暗環(huán)境中室溫下孵育15分鐘。

10）加100µL終止液至每個(gè)微孔中。

11）在加入終止液溶液后的30分鐘內(nèi)，用酶標(biāo)儀讀取在450/620nm處的吸光度

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