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抗精子抗體試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
科潤達生物公司提供進口德國IBL品牌的抗精子抗體試劑盒,本次介紹的抗精子抗體試劑盒通過FDA認(rèn)證,可用于臨床使用??咕涌贵w試劑盒采用的是ELISA檢測方法,該方法檢測時間較短,操作起來簡單方便,無需特殊儀器,本產(chǎn)品的靈敏度高、特異性強,并且可檢測96人份,可更多的節(jié)約時間成本,歡迎您咨詢了解。此外科潤達生物公司還提供代測服務(wù),保證使用的產(chǎn)品是國外進口試劑,并且提供完整的數(shù)據(jù)報告??勺稍兾覀兞私獯鷾y流程。下面介紹的是抗精子抗體試劑盒的相關(guān)介紹和參數(shù)信息。
抗精子抗體介紹
抗精子抗體(AsAb)是一個復(fù)雜的病理產(chǎn)物,男女均可罹患,其確切原因尚未*明了。男性的精子、精漿,對女性來說皆屬特異性抗原,接觸到血液后,男女均可引起免疫反應(yīng),產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,阻礙精子與卵子結(jié)合,而致不孕。
通用名稱:抗精子抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名稱:Spermatozoa-Ab ELISA
產(chǎn)品規(guī)格:96T
產(chǎn)品貨號:RE52001
產(chǎn)品品牌:德國IBL
注冊證號:國械注進20142405077
抗精子抗體試劑盒預(yù)期用途
抗精子抗體試劑盒用于人血清中抗精子表面抗原自身抗體體外定性檢測??捎糜谂R床使用。
抗精子抗體簡介
在西方國家,不孕夫婦的比例占總?cè)巳旱?0~15%(Haas et al,1980)。目前人們還不能精確的知道由免疫學(xué)因素導(dǎo)致不孕的發(fā)病率是多少。由于有很多不同的檢測方法,人們對抗精子抗體在不孕中的作用存在著很大爭議。在檢測抗精子抗體的傳統(tǒng)檢測方法中,精子凝集檢測和精子固定檢測已被廣泛應(yīng)用。這些方法及其它凝集檢測都很耗費時間,并且結(jié)果與其操作不協(xié)調(diào)。與傳統(tǒng)的檢測方法相比,用ELISA檢測抗精子抗體具有很多優(yōu)點。IBL公司的抗精子抗體ELISA試劑盒結(jié)合這些優(yōu)點,并同時還具有高靈敏度和高特異性的特點。
抗精子抗體試劑盒檢測原理
抗精子抗體試劑盒利用的是非競爭性的原理。包被在微孔中的精子表面抗原是從池子中提取到的,它采用的方法是Alexander在1984年所提及到的那種方法。將疑似免疫學(xué)不孕病人的血清(已稀釋好)加入到包被孔中溫育,之后洗板,再加入過氧酶標(biāo)記的抗人免疫球蛋白(IgA,IgG和IgM)并溫育。溫育后洗板,再加入TMB底物液,并酶標(biāo)儀檢測所顯示的顏色強度。微孔中所顯示的顏色強度與結(jié)合的免疫球蛋白濃度成正比。實驗結(jié)果可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取,結(jié)果單位為units/ml。
抗精子抗體試劑盒組成成分
名稱 | 數(shù)量 | 成分 |
微孔板 | 12×8孔 | 微孔中包被了精子表面抗原。 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 3支凍干粉 | 將每支凍干粉溶解于1ml的洗滌液中。重新配制好的標(biāo)準(zhǔn)品(標(biāo)準(zhǔn)品S5)100μl內(nèi)含500mU抗精子抗體。 |
酶聯(lián)物 | 100μl | 601倍濃縮,內(nèi)含HRP標(biāo)記的抗人IgG、IgA、IgM,使用前用稀釋液按1:601的比例進行稀釋。 |
底物液 | 12ml | 即用 |
終止液 | 12ml | 即用 |
洗滌液 | 50ml | 20倍濃縮,用雙蒸水按1:20的比例稀釋,配置好的洗滌液在2-8℃的環(huán)境下可穩(wěn)定存放4周。 |
稀釋液 | 3瓶凍干粉 | 將每瓶溶于20ml洗滌液中制成稀釋液。 |
質(zhì)控血清 | 3瓶凍干粉 | 將每瓶溶于1ml洗滌液中。 |
儲存條件
抗精子抗體試劑盒應(yīng)當(dāng)2~8℃的環(huán)境下運輸。微孔板條一但被拆開,應(yīng)當(dāng)將其重新密封好。拆開了板條儲存于2~8℃的環(huán)境下時,其免疫活性可穩(wěn)定6周。
樣本要求
按照一般原則進行靜脈采血。不要使用明顯溶血、黃疸血和脂血樣品。采集的樣品存放于2~8℃的環(huán)境下時,必須在24小時內(nèi)將其檢測掉。如果想將血清存放更長時間,可以將血清凍存于-20℃的環(huán)境下,避免反復(fù)凍融。
用稀釋液將病人樣品按1:51的比例進行稀釋(例如:10μl樣品+500μl稀釋液),混合均勻。稀釋好的樣品于2~8℃下可保存24小時。
檢驗方法
實驗開始前將所需數(shù)目的板條和所有試劑都平衡到室溫。試劑盒可分3次進行檢測,下面所述體積可用來檢測4條包被板條(32個檢測孔)。如果實驗中需使用更多板條,則體積應(yīng)當(dāng)相應(yīng)的進行改變。
洗滌液
將30ml濃縮的洗滌液中加入到600ml雙蒸水中。配置好的洗滌液在2-8℃的環(huán)境下可穩(wěn)定存放4周。冷藏時溶液會出現(xiàn)磷酸鹽沉淀物,室溫下又會溶解。
稀釋液
每支凍干的稀釋液中加入到20ml即用型的洗滌液中。配置好的稀釋液在2-8℃的環(huán)境下可穩(wěn)定存放2天,如果凍存于-20℃的環(huán)境下則可存放更長時間。標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控血清
抗精子抗體試劑盒檢測步驟
1、加100μl標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣本于相應(yīng)反應(yīng)孔中
2、封板后37℃溫育60分鐘。
3、每孔用250μl洗滌液洗板3次(建議您使用洗板機),吸水紙上拍干。
4、在每一微孔中加入100μl酶聯(lián)物。
5、封板后37℃溫育60分鐘。
6、每孔用250μl洗滌液洗板3次
7、在每一微孔加TMB底物液100μl。
8、室溫(18℃~24℃)溫育10-15分鐘。
9、每孔加100μl終止液以終止底物反應(yīng),輕輕振板以使溶液混合均勻。
10、加終止液后30min內(nèi)在450nm讀取OD值。(參照波長:600~650nm)
科潤達生物公司目前有12個產(chǎn)品有注冊證,均可用于臨床使用。本次僅介紹這款,其他的產(chǎn)品還有C肽、EB病毒EA、EB病毒EVA、17α羥孕酮、游離雌三醇、游離睪酮、CA72-4、PKU、胰島素、胰島素生長因子-1和HPL。歡迎咨詢獲取資料。
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