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5-羥色胺檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)(超敏)
通用名稱:5-羥色胺檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)(超敏)
英文名稱:(簡寫:5-HT)ELISA
產品貨號:RE59141
產品規(guī)格:96T
產品品牌:德國IBL
5-HT試劑盒預期用途
5-HT試劑盒可用于低濃度及小體積樣本中五羥色胺的定量檢測。僅用于科研使用。
前言簡介
五羥色胺是色.氨.酸代謝的中間產物,它主要存在于腸嗜鉻細胞、血清素激活的神經元和血小板中,它已被確定為是中樞神經系統(tǒng)的一種神經遞質??梢栽谀c粘膜的嗜鉻細胞、血小板及腦血清素激活的神經元中發(fā)現(xiàn)高濃度的五羥色胺。中樞血清素的神經元可以影響生理功能,如睡眠和激素水平的調整。血清中五羥色胺水平的增高可見于惡性類癌、內源性抑郁癥及精神分裂癥。
5-HT試劑盒檢測原理
將樣品分別與?;噭┮黄饻赜罂梢缘玫锦;奈辶u色胺。此實驗采用的是競爭性ELISA的原理,酰化的五羥色胺與抗血清競爭性結合到一定數量的抗體結合位點上。當反應系統(tǒng)達到平衡后,洗板除去未結合抗原及抗血清復合物。結合在固相上的抗體被抗兔的過氧化物酶檢測到,在450nm處檢測底物液與過氧化物酶的反應。結合到固相上的五羥色胺抗體的量與樣品中五羥色胺的濃度成反比。
儲存條件
5-HT試劑盒和運輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃,避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準備將在相關章節(jié)中闡述。打開了的試劑盒在有效期內穩(wěn)定,前提是要將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃下。
5-HT試劑盒組成成分
數量 | 標記 | 成分 |
1×12×8 | MTP | 包被板,可拆,微孔中包被五羥色胺 |
1×4ml | CAL CONC | 標準品濃縮型,濃度500ng/mL |
1×2×4ml | CONTROL 1+2 | 質控品1+2,濃縮型(500×)濃度及范圍詳見質控單。 |
1×4ml | ACYL BUF LOY | 酰化液,凍干粉 |
1×1ml | ACYL BUF LOY CONC | 酰化液,濃縮型,黃色。 |
4×2.5ml | ACYLREAG LYO | ?;噭?,凍干粉 |
1×3ml | DEAC | 鈍化劑,即用,藍色 |
1×12ml | ENZCONJ | 酶聯(lián)物,即用。 |
1×20ml | WASHBUF CONC | 洗滌液,25倍濃縮 |
1×12ml | TMB SUBS | 底物液,即用 |
1×12ml | TMB STOP | 終止液,即用,內含0.3M硫酸 |
2×6ml | SOLVENT | SOLVENT 溶劑。即用。 |
1×2ml | ASC ACID | 抗壞血酸即用。內含10%抗壞血酸 |
1×50ml | ASSAYBUF | 檢測緩沖液使用前需加入抗壞血酸。內含10mM PBS (0.9% NaCl),穩(wěn)定劑。 |
實驗所需器材但試劑盒不提供
●移液器,體積:10;20;25;50;100;200μl
●用于標準品稀釋的聚丙烯(PP)試管或聚丙烯(PP)微量試管
●試管架
●軌道搖床(500rpm)
●旋渦混合器
●帶儲器的8道移液器
●洗滌瓶,自動或半自動洗板機
●可在450nm處讀數的酶標儀(參考波長:570-650nm)
●雙蒸水或去離子水
●吸水紙、取樣吸頭和計時器
5-HT試劑盒檢測步驟
1 | 將?;臉藴势?、酰化的質控品和?;臉悠犯?/span>50μl加入到相應的微孔中。 |
2 | 粘合鋁箔覆蓋微孔板,在2-8℃孵育15-10小時(過夜) |
3 | 移取粘合鋁箔,棄去孵育液,每孔用250ul稀釋的洗滌液洗滌微孔板4次,在紙巾上拍干除去殘余液體。 |
4 | 在每一微孔中加入100μl酶聯(lián)物。 |
5 | 蓋板,室溫(18-25℃)下?lián)u床振蕩(500rpm)溫育60min。 |
6 | 移去粘合鋁箔,棄去孵育液,每孔用250ul稀釋的洗滌液洗滌微孔板4次,在紙巾上拍干除去殘余液體。 |
10 | 在每一微孔中加入100μlTMB底物液。 |
11 | 室溫(18-25℃)下?lián)u床振蕩(500rpm)溫育20-30min。 |
12 | 在每一微孔中加入100μl終止液以終止底物反應,輕輕振板以使溶液混合均勻。 |
13 | 加終止液后15min內450nm(參考波長570-650nm)處讀取OD值。 |
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