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腎上腺素ELISA試劑盒
腎上腺素ELISA試劑盒產(chǎn)品詳細(xì)
中文名稱 | 腎上腺素ELISA試劑盒 |
英文名稱 | Adrenalin ELISA (Epinephrine) |
產(chǎn)品貨號(hào) | RE59251 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 96T |
檢測(cè)樣本 | 血漿和尿液 |
適應(yīng)物種 | 人 |
預(yù)期用途 | 可用于人血漿和尿液中腎上腺素的體外定量檢測(cè) |
儲(chǔ)存條件 | 2~8℃ |
產(chǎn)品品牌 | 德國(guó)IBL |
供應(yīng)商家 | 深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司 |
腎上腺素ELISA試劑盒預(yù)期用途
腎上腺素ELISA試劑盒可用于人血漿和尿液中腎上腺素的體外定量檢測(cè)。
腎上腺素ELISA試劑盒檢測(cè)原理
腎上腺素ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗體。之后加入的液態(tài)抗體可以結(jié)合到抗原分子的一個(gè)抗原決定簇上,而抗原分子可在溫育期內(nèi)結(jié)合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶標(biāo)二抗一起在微孔內(nèi)溫育,此酶標(biāo)二抗可結(jié)合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后,溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。
腎上腺素ELISA試劑盒貯存與穩(wěn)定性
腎上腺素ELISA試劑盒和運(yùn)輸環(huán)境和儲(chǔ)存環(huán)境溫度為2-8℃,避免熱源或太陽直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定,前提是要將試劑盒用袋子密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。
腎上腺素ELISA試劑盒成分
注意:試劑盒有足夠做96份單孔檢測(cè)或48份雙孔檢測(cè)所需的試劑成分
數(shù)量 | 標(biāo)志 | 成分 |
1×12×8 | MTP | 包被板,可拆,微孔中包被了抗兔IgG(羊,多克隆抗體)。 |
1×6×2.5ml | CAL A-F | 標(biāo)準(zhǔn)品A-F,即用 腎上腺素:0;1.5;5;15;50;150ng/ml(0;8;27;82;273;819nmol/L) 去甲腎上素:0;5;15;50;150;500ng/mL(0;30;89;296;887;2955nmol/L) 多巴胺:0;60;180;585;2300;11470ng/mL (0;392;1175;3819;15014;74876nmol/L) 內(nèi)含[-]腎上腺素,[-]去甲腎上腺素,[-]多巴胺(有生物活性),0.1M的HCl |
1×2×2.5ml | CONTROL 1+2 | 質(zhì)控品1+2 即用,內(nèi)含[-]腎上腺素,[-]去甲腎上腺素,[-]多巴胺(具有生物活性),0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽. |
1×400μL | ENZCONJ CONC | 酶聯(lián)物 濃縮型(50×) 內(nèi)含:堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體,Tris緩沖液,HCl,0.01%的NaN3 |
2× | EXTRPLATE | 提取板(微孔板) 每板24孔,包被了硼酸親和凝膠。 |
1×60ml | EXTRBUF | 提取緩沖液 粉紅色,即用,內(nèi)含:0.016%的NaN3。 |
2×1.25ml | C OMT LYO | C OMT凍干粉 內(nèi)含:兒茶酚-氧位-甲基轉(zhuǎn)移酶(豬肝),NaN3 |
1×2ml | C OMT ADD | C OMT添加劑 內(nèi)含:人血漿,穩(wěn)定劑,0.01%硫柳汞。 |
1×8ml | ANTISERUM AD | 腎上腺素抗血清 綠色,即用,內(nèi)含:抗腎上腺素抗體(兔),緩沖液,穩(wěn)定劑。 |
2×1.25ml | COENZ | 輔酶溶液 即用,內(nèi)含:S-腺苷-L-蛋白酸,穩(wěn)定劑。 |
1×3ml | ENZBUF | 酶緩沖液 即用,內(nèi)含:Tris緩沖液,HCl,穩(wěn)定劑。 |
1×13ml | RELEASEBUF | Release緩沖液 黃色,即用,內(nèi)含:0.1M的HCl,指示劑。 |
1×3ml | ACYLREAG | 酰化試劑 即用,內(nèi)含:二甲基甲酰胺,乙醇。注意:有毒,高可燃性。 |
1×100ml | WASHBUR CONC | 洗滌液 濃縮型(10×) 內(nèi)含:Tris緩沖液,HCl,吐溫,0.2%的NaN3 |
1×25ml | PNPP SUBS | PNPP底物片 內(nèi)含:對(duì)硝基苯磷酸(PNPP) |
1×15ml | PNPP STOP | PNPP終止液 即用,內(nèi)含:1M的NaOH,0.25M的EDTA |
3× | FOIL | 粘性金屬板 |
腎上腺素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒不提供)
■移液器(10;10-100;100-1000μL)
■軌道搖床(200-900rpm)
■旋渦混合器
■帶儲(chǔ)器的8通道移液器
■洗滌瓶,自動(dòng)或半自動(dòng)包被板清洗系統(tǒng)
■酶標(biāo)儀
■雙蒸水或去離子水
■吸水紙,取樣吸頭,計(jì)時(shí)器
■樣本稀釋試管
■0.1M HCL,用于尿液樣本稀釋
腎上腺素ELISA試劑盒檢測(cè)步驟(手工版)
1.C OMT酶溶液的準(zhǔn)備
注意!C OMT酶溶液現(xiàn)配現(xiàn)用 |
用1.25mL的蒸餾水溶解C OMT,混勻*;然后將1.25mL的輔酶液、1.25mL酶緩沖液和0.40mL的C OMT附加液混勻到C OMT酶溶液中,終定容到4.15mL/支。3支分別用于檢測(cè)腎上腺素,去甲腎上腺素和多巴胺。溶液可能有些渾濁。充分混勻,避免起泡。C OMT溶液在室溫下能保持穩(wěn)定1小時(shí) |
*如果C OMT溶液只需要使用一部分,剩下的C OMT溶液應(yīng)該在-20℃下分裝凍存。這些C OMT溶液在上述條件下能穩(wěn)定保存1~2個(gè)月。
1.樣本、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的酶衍生化(微孔板)
注意 | 如果要檢測(cè)腎上腺素和去甲腎上腺素,我們建議您先檢測(cè)腎上腺素。如果使用自動(dòng)置換型洗液器加樣,請(qǐng)將取樣吸頭內(nèi)的殘余液體加入到提取板的相應(yīng)微孔內(nèi),否則剩余的提取液不夠去甲腎上腺素檢測(cè)用。將提取板放到有一定坡度的位置上。實(shí)驗(yàn)開始前,確定好腎上腺素和去甲腎上腺素的檢測(cè)孔并標(biāo)記好。 |
尿液與血漿中的去甲腎上腺素
1 | 在包被板的每一微孔中加入75μL剛配置好的C OMT酶溶液,輕輕振蕩。 |
2 | 將100ul提取的標(biāo)準(zhǔn)品,質(zhì)控品和樣本加入至相應(yīng)的孔內(nèi),在此步驟中,將槍頭直接觸碰C OMT酶溶液,顏色會(huì)轉(zhuǎn)為粉紅色,輕輕混勻 |
3 | 在每一微孔中加入50ul腎上腺素抗血清(綠色)。 |
4 | 蓋板,在振蕩器(400-600rpm)上室溫(18-25℃)溫育120min |
5 | 移去粘性金屬板,棄取孔內(nèi)反應(yīng)液,每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板4次。吸水紙上拍干以除去殘余液體。 |
6 | 在每一微孔中加入100ul臨時(shí)配置好的酶聯(lián)物。 |
7 | 蓋板,在振蕩器(400-600rpm)上室溫(18-25℃)溫育60min |
8 | 移去粘性金屬板,棄取孔內(nèi)反應(yīng)液,每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板4次。吸水紙上拍干以除去殘余液體。 |
9 | 如果可以的話,使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同,使用自動(dòng)置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。 |
10 | 在每一微孔中加入200ulPNPP底物液 |
11 | 在振蕩器(400-600rpm)上室溫(18-25℃)溫育40min |
12 | 在每一微孔中加入50ul PNPP終止液,輕輕振板以使溶液混合均勻。 |
13 | 加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。(參考波長(zhǎng):620-650nm) |
期望值
實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作判斷任何治療結(jié)果的為一因素,疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測(cè)相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值(5%-95%),建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室讀確定自己的正常值范圍:
尿液 | 血漿 | |||
μg/d | nmol/d | pg/mL | nmol/L | |
去甲腎上腺素 | <20 | <110 | <125 | <0.68 |
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