脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

ELISA方法操作結(jié)果判斷過程常見問題及解答

1） 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性差，或者沒有運(yùn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線；質(zhì)控不在控。

2） 出現(xiàn)假陰性結(jié)果或假陽性結(jié)果

3） 測定結(jié)果的重復(fù)性差

4） 全部板孔不顯色或全部顯色，無法判斷結(jié)果

解決方法：

1. 加樣時(shí)，不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品使用不同槍頭。標(biāo)準(zhǔn)品稀釋過程要保證量和均勻性。標(biāo)準(zhǔn)品可做復(fù)孔測定，明顯偏離的標(biāo)準(zhǔn)品可舍去。每次測試，都要運(yùn)行標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確。質(zhì)控品不在質(zhì)控單檢測范圍內(nèi)時(shí)，說明實(shí)驗(yàn)無效，不能報(bào)告實(shí)驗(yàn)結(jié)果，需要重新檢測。

2. 出現(xiàn)假陰性樣本可能是孵育溫度和時(shí)間不足，酶標(biāo)記物加樣量不足，顯色時(shí)間短等原因，讀數(shù)時(shí)終止時(shí)間過長等，應(yīng)嚴(yán)格按照說明書操作要求進(jìn)行；

出現(xiàn)假陽性樣本可能是洗滌不充分，酶過量，類風(fēng)濕因子干擾，樣本溶血，脂血等，實(shí)驗(yàn)過程中，注意樣本要求，洗板步驟，保證充分洗板，酶標(biāo)記物加樣量要準(zhǔn)確，顯色時(shí)間充分，終止后盡快讀板等。

1. 重復(fù)性差可能是加樣本及試劑量不準(zhǔn)，孔間不*?；加樣過快，孔間發(fā)生污染?；加錯(cuò)樣本?；加樣本及試劑時(shí)，加在孔壁?；不同批號試劑盒中組分混用?；溫育時(shí)間、洗板、顯色時(shí)間不*等，實(shí)驗(yàn)過程要注意上述操作。

2. 整板不顯色可能是忘記加酶或者試劑失效，酶污染，錯(cuò)加試劑等；整板顯色可能是洗滌液被酶污染，顯色液變質(zhì)，包被板不干凈等；實(shí)驗(yàn)過程中，應(yīng)注意避免試劑的污染或交叉污染，加樣前認(rèn)真辨別試劑，避免錯(cuò)誤加樣。

通用名稱：脊髓灰質(zhì)炎病毒 IgG檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名稱：Poliovirus IgG ELISA
公司品牌：德國IBL
產(chǎn)品貨號：RE56921
產(chǎn)品規(guī)格：96T
檢測樣本：血清和血漿
儲(chǔ)存條件：2—8℃
檢測方法：ELISA
預(yù)期用途：僅用于科研，體外檢測使用
參考價(jià)格：詢價(jià)
供應(yīng)商家：深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司

脊髓灰質(zhì)炎病毒ELISA檢測試劑盒產(chǎn)品規(guī)格
96T

脊髓灰質(zhì)炎病毒ELISA檢測試劑盒預(yù)期用途
   脊髓灰質(zhì)炎病毒 IgG檢測試劑盒可用于血清和血漿中抗脊髓灰質(zhì)炎特異性IgG抗體的定性和定量檢測。

脊髓灰質(zhì)炎病毒 IgG檢測試劑盒簡介
   脊髓灰質(zhì)炎是一種由腸道病毒引起的傳染病，它廣泛流行于世界各地，并常常導(dǎo)致病人癱瘓和死亡。人類目前知道的人致病性脊髓灰質(zhì)炎有三種類型：
1類（Brunhilde）：通常會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的癥狀。
2類（Lansing）：出現(xiàn)稍微溫和的癥狀。
3類（Leon）：少，但伴隨嚴(yán)重癥狀。
   脊髓灰質(zhì)炎病毒主要增生擴(kuò)展在腸道的淋巴節(jié)內(nèi)，并通過糞便排泄出去。咽喉也可能會(huì)感染脊髓灰質(zhì)炎病毒，之后病毒就會(huì)遺留在人體口腔內(nèi)。人感染脊髓灰質(zhì)炎后，病毒就可以通過單核細(xì)胞分布到其它淋巴節(jié)，之后在淋巴節(jié)繁殖成各種脊髓灰質(zhì)炎病毒。在第二個(gè)病毒血癥階段，病毒就停留在所有的器官和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的其它器官中。在90%以上感染了脊髓灰質(zhì)炎的病人都不會(huì)出現(xiàn)任何主觀癥狀，而其它剩余的病例中會(huì)出現(xiàn)：伴隨低燒的非特異性疾病、頭痛和喉嚨發(fā)炎、痢疾、嘔吐。
   脊髓灰質(zhì)炎目前還沒有治療方法，僅有阿司匹林和適當(dāng)?shù)倪\(yùn)動(dòng)對癥治療會(huì)有些效果。通過檢測糞便或咽喉沖洗物中的傳染原或檢測血液中的抗體可診斷脊髓灰質(zhì)炎。血液抗體的檢測通常是通過中和檢測進(jìn)行的，雙份血清檢測有滴度差異，所以三種類型脊髓灰質(zhì)炎病毒必須分別檢測。最近，脊髓灰質(zhì)炎IgG ELISA實(shí)驗(yàn)用類似白喉和百日咳的方法進(jìn)行了改進(jìn)，這種新的ELISA試劑盒可同時(shí)檢測三種類型的脊髓灰質(zhì)炎病毒。這種血清學(xué)反應(yīng)是由既往感染或免疫接種所導(dǎo)致的。

脊髓灰質(zhì)炎病毒 IgG檢測試劑盒檢測原理
   脊髓灰質(zhì)炎病毒 IgG檢測試劑盒是一種利用夾心法的固相酶聯(lián)免疫試劑盒。微孔用抗原包被，樣品中的特異性抗體結(jié)合到微孔中抗原上，之后加入對人IgG具有特異性的酶標(biāo)二抗。之后再加入底物液，微孔中溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與檢測到的特異性抗體的量成正比。樣品的結(jié)果可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上獲得。

脊髓灰質(zhì)炎病毒 IgG檢測試劑盒組成成分

脊髓灰質(zhì)炎病毒 IgG檢測試劑盒儲(chǔ)存條件
   脊髓灰質(zhì)炎病毒 IgG檢測試劑盒必須儲(chǔ)存于2~8℃的環(huán)境中，避免高溫或太陽直射。樣品和試劑的儲(chǔ)存和穩(wěn)定性將在相關(guān)章節(jié)闡述。開封微孔板在有效期內(nèi)穩(wěn)定，但在2~8℃環(huán)境下儲(chǔ)存時(shí)請把包裝袋密封好。

脊髓灰質(zhì)炎病毒 IgG檢測試劑盒檢測步驟

1. 加100ul標(biāo)準(zhǔn)品(A-D)和已稀釋的樣本于相應(yīng)反應(yīng)孔中.定性檢測中標(biāo)準(zhǔn)品僅用標(biāo)準(zhǔn)品B.

2. 封板后室溫（18℃-25℃）溫育60分鐘。

3. 棄去孔中反應(yīng)液，每孔用300ul洗滌液洗板3次，吸水紙上拍干。

4. 加100ul酶聯(lián)物于每個(gè)反應(yīng)孔中。

5. 封板后室溫（18℃-25℃）溫育30分鐘。

6. 棄去孔中反應(yīng)液，每孔用300ul洗滌液洗板3次，吸水紙上拍干。

7. 每孔加TMB底物液100ul

8. 室溫（18℃-25℃）避光溫育20分鐘

9. 依加底物的順序每孔加100ul終止液

10. 1小時(shí)內(nèi)在450nm處讀吸光度

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