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類胰島素生長因子結合蛋白3測定試劑盒(酶聯免疫吸附法)
【產品名稱】
通用名稱:類胰島素生長因子結合蛋白3測定試劑盒(酶聯免疫吸附法)
英文名稱:IGFBP-3 ELISA
【產品規(guī)格】
96T
【預期用途】
試劑盒用于體外定量測定人血清中胰島素樣生長因子結合蛋白-3(IGFBP-3)的含量。
【前言簡介】
胰島素樣生長因子(IGF)系統是正常體內生長和再生的主要調節(jié)因子,影響細胞增殖,分化和細胞凋亡。 此外,IGF-系統似乎改變胰島素敏感性和長期性葡萄糖代謝。 許多流行病學,實驗和臨床資料表明,IGF-系統也涉及幾種常見癌癥的發(fā)展以及常見疾病如動脈粥樣硬化和2型糖尿病等。
IGF家族由一系列密切相關的多肽組成,其包括兩個主要促進生長的多肽,IGF-I和IGF-II,6種特異性高親和力IGF結合蛋白(IGFBP-1至-6)和一個大的非IGF結合糖蛋白,“酸不穩(wěn)定亞單位"(ALS)。
IGFBP-3是豐富的IGF結合蛋白,占健康人循環(huán)IGF結合能力的75%以上。 IGFBP-3與IGFBP-5共享功能特性,因為兩種肽都能與ALS和IGF-I或-II的形成高分子量約150千道爾頓的三元復合物。 然而,IGFBP-5循環(huán)濃度比IGFBP-3低得多,而在健康受試者中,三元復合物攜帶多達90%的IGFBP-3但只有約50%的IGFBP-5。
IGFBP被認為是IGF-載體蛋白,穩(wěn)定血漿IGF水平并控制IGF從循環(huán)中流出至血管外隔室。此外,人們認為 IGFBP復合IGF在生物學上或多或少無活性,被剝奪了與IGF-1受體相互作用的能力。但是,很快人們就發(fā)現,在一些實驗設置中,IGFBP激活而不是抑制IGF-I介導的作用,因此,IGFBP通常被稱為IGF-1生物活性的調節(jié)劑。另外,大多數的IGFBP,特別是IGFBP-3,發(fā)揮著IGF-I和IGF-I受體的獨立作用,可能涉及位于細胞表面和細胞內的特定受體間的相互作用。例如,IGFBP-3現在被認為是作為抗癌分子服務的,它可以明顯防止幾種常見的癌癥,同時IGFBP-3在培養(yǎng)的脂肪細胞中對胰島素信號的傳導作用也被提出。
三元復合物的轉換非常緩慢,一天中IGFBP-3的血漿濃度始終保持穩(wěn)定,而不受短期營養(yǎng)變化的影響。 因此,IGFBP-3的水平可以由一個單獨測量確定。 GH是IGFBP-3以及IGF-I和ALS的主要調節(jié)因子,因此,三種多肽水平在青春期生長期間增加,其后隨著年齡的增長逐漸下降。 在兒童中,IGFBP-3已顯示與24小時GH分泌相關,因此,IGFBP-3可能對兒童GH缺陷的診斷有幫助。
【檢測原理】
GFBP3-ELISA是固相酶擴增敏感性對微孔板進行的免疫測定。標準品和樣品與包被的捕獲單克隆抗體(MAb 1)和用辣根過氧化物酶(HRP)標記的單克隆抗體(MAb 2)反應。經過孵育形成一個三明治結構:包被的MAb 1 - -人IGFBP3--MAb 2-HRP,洗滌微孔板以除去未結合的酶標記抗體。通過顯色測量結合的酶標記抗體反應。加入顯色溶液(TMB)并孵育。添加終止液終止反應,然后在適當波長下讀取微孔板。被測物含量的顯色程度與人IGFBP3濃度成正比。繪制標準曲線,樣品中IGFBP3濃度通過標準曲線可直接讀取。
【試劑盒組成成分】
成分 | 規(guī)格(96T) | 狀態(tài) | |
PLATE | 96孔微量滴定板,包被了IGFBP3(單克隆抗體) | 96孔 | 即用型 |
AbHRP CONC | 酶標記物濃縮液:HRP標記的抗IGFBP3(單抗),含procin和牛血清白蛋白的檸檬酸緩沖液 | 0.5ml*1瓶 | 用酶標記物緩沖液20倍稀釋 |
CONJ BUF | 酶標記物緩沖液:含有牛血清白蛋白和百里酚的tris緩沖液 | 10ml*1瓶 | 即用型 |
CAL N | 標準品-N=1-5,含牛血清和百里酚的磷酸鹽緩沖液。 瓶體標簽上有具體濃度。 標準品都是預稀釋過的,用稀釋液做0標準品。 | 5瓶凍干粉 | 加入1ml蒸餾水 |
DIL BUF | 稀釋液:含有牛血清,牛白蛋白和百里酚的磷酸鹽緩沖液 | 100ml*1瓶 | 即用型 |
CONTROL N | 質控品N=1或2 ,含有人血清和百里酚,質控品是預稀釋過的 | 2瓶凍干粉 | 加入1ml蒸餾水 |
WASH SOLN CONC | 洗滌液(tris-HCL) | 10ml*1瓶 | 蒸餾水200倍稀 釋(使用電磁攪拌器) |
CHROM TMB | 底物液:TMB | 12ml*1瓶 | 即用型 |
STOP SOLN | 終止液:1.0N鹽酸 | 12ml*1瓶 | 即用型 |
注意:
用稀釋液做0標準品。
校準品是針對NIBSC / WHO重組的IGFBP-3的標準化物質,參考試劑編號93/560。
所需材料(未提供)
高質量的蒸餾水
50ul,100ul,1ml的微量移液器(推薦使用一次性塑料槍頭的移液器)
稀釋樣品的塑料管
旋渦攪拌器
磁力攪拌器
酶標儀(450或者650nm)
洗板機
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