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C18色譜柱如何選擇?
C18色譜柱簡(jiǎn)稱ODS柱(十八烷基鍵合硅膠填料)是一種長(zhǎng)鏈烷基鍵合相有較高的碳含量和更好的疏水性,對(duì)各種類型的生物大分子有更強(qiáng)的適應(yīng)能力。但因鍵合方式不同、粒徑不同、長(zhǎng)短不同,內(nèi)徑差異等方面因素,呈現(xiàn)出不同的選擇性,分離效果也參差不齊。分析化學(xué)中可以根據(jù)pH環(huán)境、流動(dòng)相極性、色譜柱的分類系統(tǒng)、藥物極性等來選擇合適的C18色譜柱。
選擇C18色譜柱時(shí)應(yīng)注意:
1)在pH值正常范圍內(nèi)(2~8)可選用現(xiàn)代高純硅膠色譜柱,具有峰形好,重現(xiàn)性高和壽命長(zhǎng)的特點(diǎn),選用較短的柱子可以提高分離效率,選用較長(zhǎng)的柱子可以增加保留,選用小顆粒度的填料可以提高分離度,對(duì)分子量大的組分宜選用大孔徑填料的色譜柱。
2)分離極性大的組分(流動(dòng)相水相過大)采用AQ類似的色譜柱。
3)分離生物堿類的化合物選用經(jīng)過烷基化處理封口的填料可防止堿性化合物的拖尾現(xiàn)象。
4)酸性條件下(pH小于2)選用Zorbax Stable Bond C18類色譜柱或者寬pH值色譜柱。
5)低端堿性條件下(pH大于8)選用Zorbax Extend-C18、XBridge,XSelect,Atlantis,Symmetry,XTerra,SunFire等色譜柱。
6)選用含碳量高的柱子可以增加保留。