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技術(shù)文章

系列肽的合成或購(gòu)買

閱讀:531          發(fā)布時(shí)間:2010-11-24
    許多商業(yè)性公司可以提供合成肽,或商業(yè)化的試劑盒,或用于實(shí)驗(yàn)室的合成儀。但都價(jià)格昂貴。
 
    肽鏈的合成可以采用特制的聚乙烯大頭針作支持體的超微量固相多肽合成技術(shù),在塑料微量滴定盒或在紙上進(jìn)行。系列肽可以直接在固相支持物上用抗體檢測(cè),或者從固相支持物上切割下來(lái)再進(jìn)行分析。如果需要的只是對(duì)1~2種抗體識(shí)別的表位作圖,回答“是”或“不是”,那么該系統(tǒng)就已足夠,而且十分經(jīng)濟(jì)。如果待測(cè)抗原是一個(gè)實(shí)驗(yàn)室中的大項(xiàng)目,建議購(gòu)買那種具有游離生物素結(jié)合的、在生物素和同源肽序列間有4個(gè)氨基酸間隙的肽。購(gòu)買此種肽鏈一般是lmg,可用于4000次或更多的檢測(cè)分析。肽的濃度是經(jīng)過(guò)親和檢測(cè)分析的;肽鏈的純度也是經(jīng)過(guò)檢測(cè)的;該肽鏈具有足夠的量可供表面胞質(zhì)共振分析、親和柱或作為免疫原用。
 
    所謂便宜的方法,即固相合成肽鏈,然后直接分析,但缺少上述靈活性。合成的產(chǎn)物不能直接進(jìn)行分析,支持物必須經(jīng)過(guò)洗脫以去掉抗體和有關(guān)試劑以便再次檢測(cè)。雖然這樣做產(chǎn)物仍然可以檢測(cè)數(shù)次,如果要進(jìn)行多次檢測(cè),則不適用。
 
    此外,一套系列肽的消耗應(yīng)當(dāng)根據(jù)整個(gè)實(shí)驗(yàn)的消耗來(lái)計(jì)算。雖然購(gòu)買肽只花6000美元就能合成覆蓋400氨基酸的功能區(qū)。這些消費(fèi)并沒(méi)有包括人力開支和為眾多實(shí)驗(yàn)提供關(guān)鍵信息的開支。如果同數(shù)個(gè)實(shí)驗(yàn)室同時(shí)共用一套肽系列,將能大大減小實(shí)驗(yàn)的開銷。有關(guān)生物素標(biāo)記肽的檢測(cè)方法將在下一節(jié)闡述。肽鏈系列與固體支持物結(jié)合的方法,同有關(guān)的基本操作原則一樣,而且一般商品化的產(chǎn)物將會(huì)有附帶的操作方法。
 
    肽的合成過(guò)程非常適合*自動(dòng)控制操作,現(xiàn)在已經(jīng)有用于肽檢測(cè)的芯片產(chǎn)品。這樣的檢測(cè)將大大提高肽掃描檢測(cè)速度和降低成本。經(jīng)營(yíng)肽合成的公司應(yīng)該開發(fā)針對(duì)某些常用的關(guān)鍵蛋白質(zhì)抗原低成本的肽掃描試劑盒。

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