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技術(shù)文章

IFN-γ誘生法檢測IL—12

閱讀:402          發(fā)布時間:2012-4-21

其原理為IL-12能激活外周血淋巴細(xì)胞(PBL)產(chǎn)生IFN-γ,在一定范圍內(nèi)誘生的IFN-γ量與IL-12的量呈劑量相關(guān)性。

1.在96孔培養(yǎng)板中每孔加i00~L106個PBL細(xì)胞。
2.將待測樣本系列稀釋,分別加入各孔,lOOtuL/孔,并用不同稀釋度的I[,-12標(biāo)準(zhǔn)晶作對照。
3.培養(yǎng)18h后,取上清100~tL,測IFN-~活性(方法見本章第三節(jié))。IL-12的活性單位定義為:能誘導(dǎo)IFN-7zui大產(chǎn)率50%的IL-12量稱為1個IL-12活性單位。

尚有LAK殺傷活性法,其原理是IL-12和IL-2能協(xié)同誘導(dǎo)PBL的LAK活性,在IL-2劑量固定時,I_AK細(xì)胞活性與IL-12含量相關(guān)。然后用51Cr釋放法測LAK活性,與標(biāo)準(zhǔn)品對照可測出樣本Il,-12活性。
 

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