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技術(shù)文章

IL-1的免疫學(xué)測定法

閱讀:624          發(fā)布時(shí)間:2012-6-9

以放射免疫法為例。其原理是利用樣品IL-1與125I標(biāo)記的IL-1競爭結(jié)合吸附在Sepharose4B上的多克隆抗IL-1抗體以測定其含量,該方法可排除其他因子的干擾,還可區(qū)分IL-la和Iblb操作步驟如下:

① 將純化的抗IL-1抗體結(jié)合于Sepharose4B上,然后懸于PBS中;
② 加一定稀釋度的IL-1待測樣品,置室溫24h;
③ 再加lz51標(biāo)記IL-1至每個(gè)實(shí)驗(yàn)管中,作用24h;
④ 2 500r/min離心10min去除上清液,再用蒸餾水洗1次;
⑤ 測上清液、洗液(F)及沉淀(B)中的放射活性,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求出樣品中IL-1的含量

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