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50%的科學(xué)家,因?yàn)檫@個(gè)原因?qū)嶒?yàn)結(jié)果無(wú)法重現(xiàn)?

閱讀:1817      發(fā)布時(shí)間:2019-7-31
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實(shí)驗(yàn)失敗時(shí),害怕的是什么?

對(duì),就是對(duì)失敗的原因一無(wú)所知。

我們會(huì)懷疑儀器試劑、懷疑實(shí)驗(yàn)方法、

懷疑操作流程,甚懷疑人生。

常常有實(shí)驗(yàn)員哭訴,

為什么免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)又雙叒叕失敗了?

殊不知,

問(wèn)題很有可能出現(xiàn)在選抗體上。

 

 

我們都知道,WB、IHC、ELISA等常規(guī)實(shí)驗(yàn)技術(shù)都離不開(kāi)抗體,抗體的質(zhì)量?jī)?yōu)劣關(guān)乎實(shí)驗(yàn)的成敗,一旦抗體造假,不僅浪費(fèi)了科研者的寶貴時(shí)間、金錢及實(shí)驗(yàn)材料,甚有可能讓研究者誤入歧途(得出一系列錯(cuò)誤的實(shí)驗(yàn)結(jié)果或重復(fù)性差),而這無(wú)形中會(huì)損害他們所作出的努力以及學(xué)術(shù)聲譽(yù)。

 

抗體造假,是整個(gè)試劑行業(yè)嚴(yán)重的現(xiàn)象。據(jù)機(jī)構(gòu)顯示,在上千份抗體產(chǎn)品質(zhì)量投訴中,假貨問(wèn)題占了43%;在500份問(wèn)卷調(diào)查中,有43%的人曾使用假冒偽劣試劑耗材;703位生物學(xué)家,50%無(wú)法重復(fù)自己的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

抗體造假手段可謂是五花八門,比如直接造假(根本不知道瓶子里裝的是什么)、用分子量接近的廉價(jià)抗體冒充昂貴的稀有抗體(很難檢測(cè)出來(lái))等,常見(jiàn)的就是稀釋抗體,把一份試劑稀釋成5份,導(dǎo)致效價(jià)下降,有時(shí)有用,有時(shí)沒(méi)用。

 

關(guān)于抗體質(zhì)量穩(wěn)定性和可靠性問(wèn)題,早在08年,瑞士科研項(xiàng)目HPA就曾對(duì)29家供應(yīng)商的9000多種抗體(包括單抗和多抗)進(jìn)行WB和IHC驗(yàn)證,來(lái)檢測(cè)這些抗體是否有效。其結(jié)果竟令人大跌眼鏡:49%的抗體*無(wú)效,且僅有7%的抗體被認(rèn)為是*有效且擁有前后實(shí)驗(yàn)一致性。據(jù)估計(jì),每年因購(gòu)買質(zhì)量差的抗體導(dǎo)致的損失達(dá)到8億美金。而抗體之所以這么不穩(wěn)定并難以產(chǎn)生有效性,究其原因,一方面是因?yàn)榭贵w市場(chǎng)龐雜帶來(lái)了抗體質(zhì)量的殘次不齊,另一方面則是因?yàn)榭贵w本身就具有抗原交叉反應(yīng)性、多樣性和實(shí)驗(yàn)差異性,進(jìn)而也會(huì)影響抗體的特異性和親和性。即使是未經(jīng)污染的抗體有時(shí)也會(huì)給實(shí)驗(yàn)帶來(lái)困難,不同批次的抗體可能存在自然差異,它們可能靶向研究者預(yù)期之外的蛋白質(zhì)。所以陰性結(jié)果可能是多種原因?qū)е碌?,這種不確定性使得假冒試劑很難被發(fā)現(xiàn)。

 

現(xiàn)階段我們身處于抗體亂象泥潭之中,如何獲得一支真正有效的抗體?如何選擇和購(gòu)買抗體是關(guān)鍵,想要買到性價(jià)比高的抗體,有沒(méi)有隱藏的規(guī)則,如何煉就自己的火眼金睛?請(qǐng)繼續(xù)往下看。

 

 

1. 抗體基本的信息

 

  1. 要購(gòu)買的抗體名稱(基因名,蛋白名都可以,比如AKT);

  2. 要用于什么實(shí)驗(yàn)(可用于多種實(shí)驗(yàn),比如WB/IHC/FCM/IF);

  3. 樣本是什么種屬(可用于多種種屬,比如human/mouse/rat/rabbit);

  4. 如果是磷酸化抗體的:對(duì)磷酸化位點(diǎn)是否有要求,一般提供要檢測(cè)的磷酸化位點(diǎn),如果使用者對(duì)磷酸化位點(diǎn)沒(méi)有要求的,就由查到的品牌廠家來(lái)推薦,廠家會(huì)推薦他們賣得比較多而且效果比較好的磷酸化抗體。

 

 

 

2. 單克隆和多克隆的選擇

 

有人認(rèn)為單抗比多抗好,其實(shí)這并不是一個(gè)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)挠^點(diǎn),只能說(shuō)在可能性上單抗的特異性更好一些,而多抗的親和力會(huì)優(yōu)于單抗,并且特異性并不一定就遜于單抗,主要看抗原的設(shè)計(jì)水平。不建議糾結(jié)于單抗好還是多抗好。在選擇上一般建議實(shí)驗(yàn)種屬和抗體種屬親緣性越遠(yuǎn)越好,不宜同源。

 

3. 抗體選擇的隱藏規(guī)則  

 

  1. 質(zhì)量好,價(jià)格便宜(性價(jià)比高,索萊寶產(chǎn)品價(jià)格是國(guó)外的1/3左右,而且有小包裝規(guī)格);

  2. 到貨速度快(國(guó)外公司一般3-4周,索萊寶公司大多有現(xiàn)貨,多1周);

  3. 售前售后有保障(國(guó)外抗體咨詢投訴周期一般都非常長(zhǎng),索萊寶公司一般1周就可以解決,還可以免費(fèi)索取一些抗體小樣,抗體免費(fèi)試用活動(dòng)正在火熱進(jìn)行);

  4. 抗體的運(yùn)用可以多種實(shí)驗(yàn),反應(yīng)物種可以多樣(實(shí)驗(yàn)必須是同一類實(shí)驗(yàn),別人做IHC的抗體用做WB可能是沒(méi)有結(jié)果的);

  5. 廠家發(fā)布出的實(shí)驗(yàn)效果圖(完善的驗(yàn)證數(shù)據(jù)及詳細(xì)的信息標(biāo)準(zhǔn)是抗體選擇的必要條件),比如是否明確標(biāo)注其可以用于WB、IHC等實(shí)驗(yàn)、是否有足夠的數(shù)據(jù)支持證明該抗體適用于某一組織或者樣本(樣本的處理過(guò)程和要求)、是否有明確的抗體建議稀釋濃度、該抗體的識(shí)別位點(diǎn)是連續(xù)的氨基酸序列的一級(jí)結(jié)構(gòu)還是非連續(xù)性氨基酸的三維結(jié)構(gòu)位點(diǎn),天然的還是變性的……這些信息和數(shù)據(jù)的真實(shí)性及完整性是保證WB、IHC等實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的關(guān)鍵;

  6. 別找純代工的品牌多花冤枉錢,制造和生產(chǎn)型的供應(yīng)商對(duì)自己產(chǎn)品更加了解,出現(xiàn)問(wèn)題容易找到原因;

  7. 一定要從正規(guī)渠道購(gòu)買(生產(chǎn)商和制造商或正規(guī)的授權(quán)經(jīng)銷商);

  8. 有效的內(nèi)參抗體是實(shí)驗(yàn)結(jié)果真實(shí)可靠的重要憑證,尤其在WB實(shí)驗(yàn)中,常會(huì)借助內(nèi)參來(lái)校正蛋白定量、上樣過(guò)程中存在的實(shí)驗(yàn)誤差。值得注意的是,不同的內(nèi)參抗體只適用于一定范圍的樣本和組織,我們需要查閱參考文獻(xiàn),并根據(jù)樣本和組織的差別選擇合適的內(nèi)參抗體,以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性,索萊寶擁有完備的標(biāo)簽內(nèi)參抗體庫(kù);

  9. 常言道,實(shí)踐是檢驗(yàn)真理的標(biāo)準(zhǔn),對(duì)于文獻(xiàn)或網(wǎng)站中現(xiàn)成的已經(jīng)驗(yàn)證過(guò)的親和力高、特異性強(qiáng)的抗體,我們只需將拿來(lái)主義進(jìn)行到底即可。此時(shí)仍需要特別注意的是文章的可靠性;即便如此,在相應(yīng)抗體購(gòu)買回來(lái)后,建議做些簡(jiǎn)單預(yù)實(shí)驗(yàn)來(lái)保證抗體的特異性。如果只有陽(yáng)性有條帶,陰性沒(méi)有條帶,恭喜你,你確實(shí)買到了一支靠譜的好抗體,可以放心大膽的開(kāi)始正式實(shí)驗(yàn)了。

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4. 進(jìn)口or國(guó)產(chǎn)品牌的選擇

 

常見(jiàn)的國(guó)產(chǎn)品牌也有很多,如國(guó)產(chǎn)索萊寶品牌這幾年猶如異軍突起,近年來(lái)也被國(guó)內(nèi)外學(xué)術(shù)界認(rèn)可。無(wú)論是在價(jià)格上(折后價(jià)格一千多元)、在質(zhì)量上、包裝上(含有小包裝)、到貨速度上(2-3天)、售前咨詢、售后支持以及暫時(shí)還未出現(xiàn)假貨等方面,都能完勝其他進(jìn)口品牌,不足之處:非常用產(chǎn)品在文獻(xiàn)支持方面有些不足。為此我們特設(shè)專項(xiàng)獎(jiǎng)學(xué)金計(jì)劃,期望大家踴躍參與,無(wú)論是發(fā)文章,曬圖片和寫評(píng)論我們都有獎(jiǎng)品或獎(jiǎng)金給辛苦實(shí)驗(yàn)的科研工作者,旨在建立產(chǎn)品應(yīng)用數(shù)據(jù)庫(kù),為抗體的選擇和應(yīng)用提供參考價(jià)值。

 

 

5. 抗體的未來(lái)之星

不要小看一小瓶試劑,這是一個(gè)國(guó)家綜合實(shí)力的體現(xiàn)。中國(guó)的試劑想要*打入市場(chǎng),還需要很長(zhǎng)時(shí)間。事實(shí)上,抗體質(zhì)量問(wèn)題從來(lái)不是一個(gè)技術(shù)問(wèn)題而是一個(gè)商業(yè)利益和科研需求之間產(chǎn)生的矛盾問(wèn)題,大量抗體產(chǎn)品本身就是在國(guó)內(nèi)本土生產(chǎn),中國(guó)*具有能力生產(chǎn)高質(zhì)量抗體,與其繞遠(yuǎn),不如加大鼓勵(lì)民族本土品牌崛起。索萊寶與您一起披荊斬棘,開(kāi)疆拓土,打造中國(guó)人自己的科研產(chǎn)品小*,索萊寶相信在我們的共同努力下,一定可以讓我們自己的科研產(chǎn)品民族品牌流光溢彩。

目前,索萊寶專注于自主品牌的創(chuàng)立,建立的自主研發(fā)平臺(tái),同時(shí)聘請(qǐng)業(yè)內(nèi)資深團(tuán)隊(duì)原料的把關(guān),產(chǎn)品的研發(fā),生產(chǎn)和質(zhì)控等各個(gè)環(huán)節(jié)嚴(yán)格控制,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。同時(shí)我們順應(yīng)抗體驗(yàn)證工作組發(fā)布的驗(yàn)證抗體特異性五大策略的標(biāo)準(zhǔn)和要求,逐步建立抗體驗(yàn)證平臺(tái),對(duì)抗體進(jìn)行驗(yàn)證,力求為科研工作者提供抗體選用的參考信息,進(jìn)而提升我們產(chǎn)品的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力,增加國(guó)產(chǎn)科研產(chǎn)品的*。

 

此外,科研工作者們可共同努力,提高對(duì)假貨的意識(shí)。共享避免假貨的建議,甚可以公布銷售低質(zhì)量產(chǎn)品公司的黑名單。只有用戶積極參與到反饋數(shù)據(jù)分享,建立科研行業(yè)的“大眾點(diǎn)評(píng)”,才能夠以第三方監(jiān)督的機(jī)制促進(jìn)行業(yè)改革。請(qǐng)不要盲目相信進(jìn)口,也不要對(duì)國(guó)產(chǎn)嗤之以鼻,事實(shí)上,選抗體就像選對(duì)象,適合的才是好的。

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