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內(nèi)毒素鱟實(shí)驗(yàn),如何消除樣品干擾?

閱讀:1525      發(fā)布時(shí)間:2019-10-8
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內(nèi)毒素鱟實(shí)驗(yàn),如何消除樣品干擾?

 

在鱟試劑檢驗(yàn)內(nèi)毒素試驗(yàn)中有些樣品嚴(yán)重干擾鱟試驗(yàn)生化反應(yīng),甚使反應(yīng)不能進(jìn)行。這就需要采用特殊方法對(duì)樣品進(jìn) 行預(yù)處理。

 

1 稀釋法

相當(dāng)大一部分樣品的干擾因素在一定濃度下才起作用,把樣品適量稀釋后即可按常規(guī)方法測(cè)定。如甘露醇、慶大霉素、人血白蛋白、肝素鈉和維生素 C 等注射液等。

 

2 加熱法

有些干擾因素為不耐熱的物質(zhì),將樣品在適當(dāng)溫度下保溫一段時(shí)間,即可按常規(guī)方法測(cè) 定。如某些血液制品和生物藥品等。

 

3 調(diào)整 pH 值法

有些樣品 PH 值偏高或偏低,且鱟試劑中 pH 緩沖劑不能將反應(yīng)液調(diào)整正常范圍。這時(shí) 可用預(yù)先處理并已確認(rèn)無(wú)菌無(wú)熱原的鹽酸或氫氧化鈉液調(diào)整樣品液 pH。然后按常規(guī)方法測(cè) 定, 如氨基酸注射液。

 

4 超濾─反沖法

一般中草藥注射液成份復(fù)雜,干擾因素較多,難以用普通方法加以消除,即可用超濾法。

取樣品適量,進(jìn)行超濾,樣品藥液全部壓濾通過(guò)濾膜,內(nèi)毒素被阻濾在超濾膜片上,再取少 量無(wú)熱原水沖洗濾器、濾膜。卸開(kāi)濾器,將超濾膜反向放置濾器上,嚴(yán)密固定。再用無(wú)熱原 水將內(nèi)毒素從超濾膜上沖一量瓶中,精密加水刻度。沖洗液按常規(guī)方法測(cè)定。

 

5 固體樣品 

若固體樣品為可溶性物質(zhì),用無(wú)熱原水溶解,按上述方法進(jìn)行干擾樣品試驗(yàn)。

手術(shù)器械、一次性輸液器等固體物品的內(nèi)毒素測(cè)定,用適量無(wú)熱原水按規(guī)定方法浸泡或沖洗即可。內(nèi)毒素的水溶性較大,器具內(nèi)表面或外表面的內(nèi)毒素經(jīng)適當(dāng)時(shí)間、適當(dāng)溫度浸泡 或沖洗,即可溶入液體,按常規(guī)方法測(cè)定。

 

對(duì)于復(fù)雜樣品還需將上述各法聯(lián)合應(yīng)用。但不管單獨(dú)用其一法,或二法、三法聯(lián)用,在 操作過(guò)程中均有可能出現(xiàn)抑制或增敏等干擾作用,使測(cè)定濃度高于或低于實(shí)際濃度,這時(shí)必 須做回收率實(shí)驗(yàn),并根據(jù)測(cè)得的回收率求算內(nèi)毒素。

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