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牛冠狀病毒抗體ELISA KIT樣本處理方法

閱讀:1688      發(fā)布時(shí)間:2011-6-1
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牛冠狀病毒抗體ELISA KIT組成:

30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶
酶標(biāo)試劑 6ml×1瓶
酶標(biāo)包被板 12孔×8條
樣品稀釋液 6ml×1瓶
顯色劑A液 6ml×1瓶
顯色劑B液 6ml×1/瓶
終止液 6ml×1瓶
標(biāo)準(zhǔn)品(240pg/ml) 0.5ml×1瓶
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1瓶
說(shuō)明書(shū) 1份
封板膜 2張
密封袋 1個(gè)

本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中牛冠狀病毒抗體水平。用純化的牛冠狀病毒抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入冠狀病毒抗體,再與HRP標(biāo)記的冠狀病毒抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的牛冠狀病毒抗體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中牛冠狀病毒抗體濃度。

牛冠狀病毒抗體ELISA KIT樣品收集、處理及保存方法:

1、 血清……操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存……如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

牛冠狀病毒抗體ELISA KIT安全性:

1. 避免直接接觸終止液和底物A、B,一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

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