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赫斯特?zé)晒馊玖蠟榧?xì)胞多色成像提功有效方法

閱讀:1485      發(fā)布時(shí)間:2021-3-25
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  赫斯特?zé)晒馊玖?/strong>是親脂性熒光染料家族成員之一,它可以用來(lái)標(biāo)記細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當(dāng)熒光染料與細(xì)胞膜結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度大大增強(qiáng)。隨著生命科學(xué)的發(fā)展及熒光影像技術(shù)的不斷突破,基于熒光染料的分析手段在生物分子標(biāo)記領(lǐng)域、藥物篩選、外科手術(shù)指導(dǎo)甚至癌癥的診斷及治療等領(lǐng)域也發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。
  
  熒光染料的兩個(gè)18-碳鏈插入到細(xì)胞膜,從而進(jìn)行特定的、穩(wěn)定的細(xì)胞染色,幾乎不會(huì)發(fā)生細(xì)胞間的染料轉(zhuǎn)移。赫斯特?zé)晒馊玖蠠晒馊玖虾推渌?xì)胞膜熒光染料如橙色熒光,綠色熒光紅色熒光配合使用,為多色成像和流式細(xì)胞分析提供了有效的工具。
  
  基因無(wú)法進(jìn)行克隆的則需要用免疫熒光染色等其他技術(shù)手段來(lái)觀察目的蛋白。為此,就需要利用抗體,這些抗體連接各種不同的熒光染料,直接或間接地與相應(yīng)的靶結(jié)構(gòu)相結(jié)合。
  
  此外,借助熒光染料,熒光顯微鏡技術(shù)不只局限于蛋白質(zhì),它還可以對(duì)核酸、聚糖等其他結(jié)構(gòu)進(jìn)行染色,即便鈣離子等非生物物質(zhì)也可以檢測(cè)出來(lái)。
  
  熒光蛋白的另一項(xiàng)劣勢(shì)在于其本身屬于蛋白質(zhì)。因此,細(xì)胞內(nèi)的這些熒光蛋白具有特定的蛋白質(zhì)特性,其會(huì)導(dǎo)致附著的目的蛋白質(zhì)發(fā)生功能紊亂或出現(xiàn)誤釋的情況。然而,熒光蛋白技術(shù)仍然是觀察活細(xì)胞的選擇方法。
  
  免疫熒光法利用了抗體可以和相應(yīng)抗原特異性結(jié)合的這個(gè)特性,對(duì)此它還有兩種不同的表現(xiàn)形式。簡(jiǎn)單的方式是使用可與目的蛋白相結(jié)合的赫斯特?zé)晒馊玖稀?/div>

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