采血、分離動物血清是疫病監(jiān)測、檢測、診斷和評估免疫效果的一項前提性工作,血清分離質(zhì)量的好壞,直接影響到監(jiān)測結(jié)果,所以掌握畜禽的采血分離血清的方法尤為重要。
一、常用血液采集方法選擇
1、一次性注射器采集
采血量達到采血管容積的1/3為宜,不要超過2/3,使其凝固后自然析出血清,操作不當容易引起溶血。
2、真空采血管(抗凝劑)
可達到快速分離血漿的目的。
3、真空采血管(促凝劑)
可以使血清分離快,分離血清多不易受外界溫度的影響。還可以減少溶血現(xiàn)象的發(fā)生,真空采血管內(nèi)涂有硅酮防止紅細胞黏附于試管壁,如果使用普通的試管,紅細胞附于試管壁離心時紅細胞碎裂易溶血。
二、動物血清的分離
1、采集血液樣品后,傾斜30-45度角放置好。
2、夏天在常溫下即可,冬天要在20-30℃下靜置30-45分鐘,以利血清析出,或者先放在溫水中靜置30分鐘后再進行血清分離,否則不易析出血清。
3、在分離過程中,血樣不可劇烈搖晃以免溶血,條件允許可用離心機4000轉(zhuǎn)/分轉(zhuǎn)速下離心10分鐘或8000轉(zhuǎn)/分速度下離心3-5分鐘立即分離得到血清,不能立即分離的需及時置于25℃以上的地方過夜以便析出血清,將析出血清轉(zhuǎn)移至新的EP管內(nèi)送檢血清。
三、動物血清分離注意事項
1、血清分離的時候,有時把血液離心后會出現(xiàn)血清變成膠凍樣,可能有以下幾點原因:采血后放置時間不夠;動物個體差異;采血時間應(yīng)在采食前或采食后2小時以后;室溫低,當出現(xiàn)膠凍時可以將膠凍于血凝塊分離,將膠凍放于溫度35°左右的溫箱內(nèi)一段時間膠凍會自動化開或用玻璃棒擠壓膠凍也可析出血清。
2、在采血過程中一定要注意如果用一次性真空管時血液應(yīng)不間斷地流入管中,一旦血流間斷要另換管,否則不易析出血清。
3、溶血的血清,會影響實驗結(jié)果的準確性,應(yīng)剔除。
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