加利福尼亞州科學(xué)院(California Academy of Sciences)的Jack Dumbacher博士目前正開展轉(zhuǎn)錄組和小RNA的分離,以便鑒定宏基因組病毒序列。他的研究目標(biāo)是了解病毒與宿主的共生關(guān)系。Dumbacher博士為改善RNA提取提出了幾點(diǎn)建議。
優(yōu)化RNA的保存
盡量避免RNase
在實(shí)驗(yàn)室中,避免已純化的RNA接觸到內(nèi)源和外源的RNase關(guān)重要。在純化開始時(shí),外源RNase不怎么成為威脅。但在沒有了變性劑(如GITC)的保護(hù)以及RNA純化完成后,你就要避免接觸RNase。RNase抑制劑隔離殘留的RNase,適合大部分應(yīng)用,特別是那些包含內(nèi)源RNase的應(yīng)用??茖W(xué)院的比較基因組實(shí)驗(yàn)室使用經(jīng)DEPC處理的水。DEPC通過堿基的組氨酸修飾而讓RNase失活。同時(shí)記住,及時(shí)更換手套。
提高RNA的產(chǎn)量
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