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RNA酶的用途及破碎細(xì)胞和滅活RNA酶同步進(jìn)行的方法

閱讀:2804      發(fā)布時(shí)間:2016-5-3
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RNA酶又名核糖核酸酶,為白色凍干粉末 ,可以殺滅許多腫瘤細(xì)胞系,可以抑制導(dǎo)致艾滋病的HIV-1病毒在細(xì)胞中的復(fù)制,可以治療乙肝。

RNA酶用途說明:

生化研究,測定核酸的結(jié)構(gòu)

RNase 保護(hù)檢測

去除非特異結(jié)合的RNA

分析RNA 序列

水解蛋白樣品中的RNA

純化DNA

此外,它具有顯著的細(xì)胞毒性,可以殺滅許多腫瘤細(xì)胞系,可以抑制導(dǎo)致艾滋病的HIV-1病毒在細(xì)胞中的復(fù)制,可以治療乙肝。

破碎細(xì)胞和滅活RNA酶同步進(jìn)行的方法

用強(qiáng)烈變性如鹽酸胍或硫氰酸胍溶液能迅速溶解蛋白質(zhì), 導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎,核蛋白由于其二級(jí)結(jié)構(gòu)的破壞而從核酸上解離下來。RNA酶可耐受多種處理等,因此可聯(lián)用上述試劑,從組織中,如富含RNA酶的胰腺中,提取完整無損的RNA。下述實(shí)驗(yàn)程序系列利用RNA酶抑制劑和(或)能迅速滅活RNA酶的有關(guān)方法從組織或細(xì)胞培養(yǎng)物中分離總RNA、核內(nèi)RNA和胞質(zhì)內(nèi)RNA。

RNase酶非常穩(wěn)定,是導(dǎo)致RNA降解主要的物質(zhì)。它在一些的條件可以暫時(shí)失活,但限制因素去除后又迅速復(fù)性。用常規(guī)的高溫高壓蒸氣滅菌方法和蛋白抑制劑不能使所有的RNase*失活。為了獲得高質(zhì)量的真核細(xì)胞mRNA,必須使用RNA酶的抑制劑或采用下述的破碎細(xì)胞和滅活RNA酶同步進(jìn)行的方法,大限度地降低細(xì)胞破碎過程中所釋放的RNA酶的活性。

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