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堿性磷酸酶染色液 (偶氮偶聯(lián)法)
產品簡介 :
堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,簡稱 ALP 或 AKP)為一類磷酸酯酶,廣泛分布于哺乳動物組織內,其活性所需適 PH 9.2-9.8。 此酶主要存在于物質交換活躍之處(細胞膜),如腸上皮和腎近曲小管的刷狀緣、 附睪上皮之靜纖毛、 肝的毛細膽管膜以及微動脈和毛細血
管動脈部之內皮,還見于內質網、高爾基復合體、吞飲小泡、腸上皮溶酶體、中性粒細胞
之中性顆粒以及平滑肌之細胞膜。
堿性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)不是采用金屬沉淀法來顯示堿性磷酸酶活性,而是采用偶氮偶聯(lián)法(又稱同時偶聯(lián)法) ,其原理是在 PH 9.2-9.8 的堿性條件下,細胞內堿性磷酸酶可使 AB-BI 磷酸鹽水解,釋放出磷酸和萘酚,后者與偶聯(lián)重氮鹽生成有色產物,定位于細胞質中。該染液專門用于血液、骨髓或細胞涂片、冰凍切片、梯度入水后的石蠟切片等的堿性磷酸酶染色,堿性磷酸酶活性部位呈紅色,位于胞漿,結果較金屬鹽沉淀法可靠。
產品組成 :
名稱 規(guī)格 4×10ml 4×20ml Storage
試劑(A): ALP 固定液 10ml 20ml RT 避光
B1:AS-BI 染色液 5ml 10ml -20℃ 避光 試劑(B):ALP 孵育液
B2:FBB 染色液 5ml 10ml 4℃ 避光
臨用時,取 B1:B2 =1:1 比例混合,即為 ALP 孵育液,即配即用。
試劑(C): 蘇木素染色液 10ml 20ml 4℃ 避光
試劑(D):甲基綠染色液 10ml 20ml RT 避光
使用說明書 1 份
準備材料 :
1、載玻片、濕盒
2、普通光學顯微鏡
操作步驟 ( 僅供參考 ):
1、 血液、骨髓或細胞涂片、冰凍切片、石蠟切片入 ALP 固定液固定 3min(梯度入水后的
石蠟切片無固定) ,水洗。
2、滴加配置好的 ALP 孵育液,放入濕盒中,避光孵育 15-20min,水洗。
3、蘇木素染色液復染 5-8min 或甲基綠染色液復染 3-5min。
4、水洗、鏡檢或甘油明膠封固后鏡檢。
染色結果 :
普通光學顯微鏡:
ALP 活性部位 紅色
細胞核 藍色(蘇木素)或綠色(甲基綠)
血液、骨髓涂片結果判斷:
細胞分值 染色特點
0 無顆粒
1 稍有顆粒
2 中等程度顆粒
3 多數顆粒
4 充滿顆粒
臨床意義:
1、 類白血病反應積分明顯增高,未經治療的慢性粒細胞白血病積分明顯減低。
2、 急性細菌性感染積分明顯增高,病毒性感染積分多正?;驕p低。
3、 再生障礙性貧血積分常增高,PNH、MDS 積分常減低。
注意事項 :
1、血液或骨髓細胞涂片或其他樣本均應新鮮,厚薄適宜,及時固定,否則會影響酶的活性。
2、ALP 孵育液易失效或降低陽性強度,即配即用,不宜久置。
3、復染時,蘇木素染色液或甲基綠染色液二者取其一。
4、每次染色時,應有陽性對照片。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期 :6 個月