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更新時(shí)間:2024-07-24 17:11:32瀏覽次數(shù):1444評(píng)價(jià)
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堿性磷酸酶染色液 (偶氮偶聯(lián)法)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介 :
堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,簡(jiǎn)稱 ALP 或 AKP)為一類磷酸酯酶,廣泛分布于哺乳動(dòng)物組織內(nèi),其活性所需適 PH 9.2-9.8。 此酶主要存在于物質(zhì)交換活躍之處(細(xì)胞膜),如腸上皮和腎近曲小管的刷狀緣、 附睪上皮之靜纖毛、 肝的毛細(xì)膽管膜以及微動(dòng)脈和毛細(xì)血
管動(dòng)脈部之內(nèi)皮,還見(jiàn)于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復(fù)合體、吞飲小泡、腸上皮溶酶體、中性粒細(xì)胞
之中性顆粒以及平滑肌之細(xì)胞膜。
堿性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)不是采用金屬沉淀法來(lái)顯示堿性磷酸酶活性,而是采用偶氮偶聯(lián)法(又稱同時(shí)偶聯(lián)法) ,其原理是在 PH 9.2-9.8 的堿性條件下,細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶可使 AB-BI 磷酸鹽水解,釋放出磷酸和萘酚,后者與偶聯(lián)重氮鹽生成有色產(chǎn)物,定位于細(xì)胞質(zhì)中。該染液專門用于血液、骨髓或細(xì)胞涂片、冰凍切片、梯度入水后的石蠟切片等的堿性磷酸酶染色,堿性磷酸酶活性部位呈紅色,位于胞漿,結(jié)果較金屬鹽沉淀法可靠。
產(chǎn)品組成 :
名稱 規(guī)格 4×10ml 4×20ml Storage
試劑(A): ALP 固定液 10ml 20ml RT 避光
B1:AS-BI 染色液 5ml 10ml -20℃ 避光 試劑(B):ALP 孵育液
B2:FBB 染色液 5ml 10ml 4℃ 避光
臨用時(shí),取 B1:B2 =1:1 比例混合,即為 ALP 孵育液,即配即用。
試劑(C): 蘇木素染色液 10ml 20ml 4℃ 避光
試劑(D):甲基綠染色液 10ml 20ml RT 避光
使用說(shuō)明書 1 份
準(zhǔn)備材料 :
1、載玻片、濕盒
2、普通光學(xué)顯微鏡
操作步驟 ( 僅供參考 ):
1、 血液、骨髓或細(xì)胞涂片、冰凍切片、石蠟切片入 ALP 固定液固定 3min(梯度入水后的
石蠟切片無(wú)固定) ,水洗。
2、滴加配置好的 ALP 孵育液,放入濕盒中,避光孵育 15-20min,水洗。
3、蘇木素染色液復(fù)染 5-8min 或甲基綠染色液復(fù)染 3-5min。
4、水洗、鏡檢或甘油明膠封固后鏡檢。
染色結(jié)果 :
普通光學(xué)顯微鏡:
ALP 活性部位 紅色
細(xì)胞核 藍(lán)色(蘇木素)或綠色(甲基綠)
血液、骨髓涂片結(jié)果判斷:
細(xì)胞分值 染色特點(diǎn)
0 無(wú)顆粒
1 稍有顆粒
2 中等程度顆粒
3 多數(shù)顆粒
4 充滿顆粒
臨床意義:
1、 類白血病反應(yīng)積分明顯增高,未經(jīng)治療的慢性粒細(xì)胞白血病積分明顯減低。
2、 急性細(xì)菌性感染積分明顯增高,病毒性感染積分多正?;驕p低。
3、 再生障礙性貧血積分常增高,PNH、MDS 積分常減低。
注意事項(xiàng) :
1、血液或骨髓細(xì)胞涂片或其他樣本均應(yīng)新鮮,厚薄適宜,及時(shí)固定,否則會(huì)影響酶的活性。
2、ALP 孵育液易失效或降低陽(yáng)性強(qiáng)度,即配即用,不宜久置。
3、復(fù)染時(shí),蘇木素染色液或甲基綠染色液二者取其一。
4、每次染色時(shí),應(yīng)有陽(yáng)性對(duì)照片。
5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期 :6 個(gè)月
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)