4',6-二脒基-2-苯基吲哚（染色劑） DAPI
貨號：D8200
規(guī)格：10mg
用途：DNA鏈熒光染色。
分子式：C 16 H 15 N 5 · 2HCl 
分子量：350.25

DNA鏈熒光染色。

     DAPI是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料。和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生比DAPI自身強20多倍的熒光。和EB(ethidium bromide)相比，對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。

     DAPI染色常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。

     DAPI的大激發(fā)波長為340nm，大發(fā)射波長為488nm；DAPI和雙鏈DNA結(jié)合后，大激發(fā)波長為364nm，大發(fā)射波長為454nm。

    本DAPI溶液用水配制，參考濃度20mg/ml，加熱有助于溶解。

    用于細胞核染色時，推薦的DAPI工作濃度為0.5-10μg/ml。

運輸與保存方法
     常溫運輸。粉末在室溫下穩(wěn)定，需避光儲存。

注意事項
1)DAPI對人體有一定刺激性，請注意適當防護。
2)熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。
3)為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4)為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

配制母液
    用雙蒸水溶解，終濃度為1mg/ml。本產(chǎn)品不可以用緩沖液直接溶解。-20℃可保存1年，建議分裝保存，避免反復凍融。

使用方法
1.配制工作液：用雙蒸水或PBS稀釋母液，配制成所需要的工作的濃度（0.5-10μg/ml）。
2.固定的細胞或組織染色：
對于固定的細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的后進行。如果不需要進行其它染色，則直接進行DAPI 染色。
a)對于貼壁細胞或組織切片：加入適量DAPI染色液，覆蓋住樣品即可。
對于懸浮細胞：少加入待測染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。
b)吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
c)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長360nm，發(fā)射波長460nm。
3. 活細胞或組織染色：
a)細胞培養(yǎng)物中加入適量DAPI染色液，約1/10細胞培養(yǎng)基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1ml染色液，對于96孔板一個孔需加入100μl染色液。
b)在 37℃培養(yǎng)細胞 10～20 分鐘。
c)用 PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。
d)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長360nm，發(fā)射波長460nm。

 相關(guān)文獻：

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《The effects of fluoride on neuronal function occurs via cytoskeleton damage and decreased signal transmission》 作者:Lingli Chen,Hongmei Ning,Zhihong Yin,Xiaochao Song,Yongchao Feng,Hao Qin,Yi Li,Jundong Wang,Yaming Ge,Wenkui Wang 期刊:Chemosphere 影響因子:4.427 PMID:28719878
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《The role and mechanism of transforming growth factor beta 3 in human myocardial infarction‐induced myocardial fibrosis》 作者:Ke Xue , Jun Zhang , Cong Li , Jing Li , Cong Wang,  Qingqing Zhang,  Xianlu Chen , Xiaotang Yu , Lei Sun ,Xiao Yu 期刊:Journal of Cellular and Molecular Medicine 影響因子:4.658 PMID:30983140
《Halloysite nanotubes coated 3D printed PLA pattern for guiding human mesenchymal stem cells (hMSCs) orientation》 作者:Fan Wu,Jingqi Zheng,Zhixiong Li,Mingxian Liu 期刊:Chemical Engineering Journal 影響因子:8.355 PMID:
 

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