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染色劑普魯士藍染色試劑盒(Perls stain,核固紅法)
產(chǎn)品簡介 :
含鐵血黃素(Hemosiderin)是一種血紅蛋白源性色素,為金黃色或棕黃色顆粒,因其含鐵、金黃色,故稱為含鐵血黃素。當(dāng)紅細胞被巨噬細胞吞噬后,在溶酶體酶的作用下,血紅蛋白被分解為不含鐵的橙色血質(zhì)和含鐵的含鐵血黃素。
Perls 普魯士藍反應(yīng)(Prussian blue reaction)又稱為含鐵血黃素染色,即經(jīng)過亞鐵和稀酸處理后可以產(chǎn)生藍色,常見于吞噬細胞內(nèi)會間質(zhì)內(nèi),主要顯示三價鐵鹽。Perls 普魯士藍是非常經(jīng)典的組織化學(xué)反應(yīng),是顯示組織內(nèi)三價鐵的一種敏感、傳統(tǒng)優(yōu)良的方法,其染色原理為: 亞鐵溶液使三價鐵離子從蛋白質(zhì)中被稀鹽酸分離出來, 三價鐵與亞鐵反應(yīng), 生成一種不溶解的藍色化合物即三價鐵的亞鐵普魯士藍, 所以該反應(yīng)被稱為普魯士藍反應(yīng)。 三價鐵的亞鐵是一種很穩(wěn)定的化合物, 在反應(yīng)后可用紅色染色劑進行復(fù)染,如核固紅、伊紅、中性紅等。
Perls stain 常用于顯示局部組織內(nèi)各種出血性病變,常見于吞噬細胞內(nèi)。在判斷含鐵血黃素沉積時,用 Perls 反應(yīng)可以得到證實,該染色方法可以很好的區(qū)分含鐵血黃素和其他色素。該染色液穩(wěn)定性好、可以長期保存、不易產(chǎn)生沉淀、應(yīng)用范圍廣、可以進行復(fù)染。該染色液的復(fù)染液采用核固紅,是經(jīng)典、常用的復(fù)染液。
產(chǎn)品組成 :
規(guī)格 | 2×50ml | 2×100ml | Storage |
Perls stain A | 25ml | 50ml | RT 避光 |
Perls stain B | 25ml | 50ml | RT |
臨用前,取 A1、A2 等量混合,即為試劑(A)Perls stain,不宜提前配制。 | |||
試劑(B): 核固紅染色液 | 50ml | 100ml | RT 避光 |
使用說明書 | 1 份 |
自備材料:
1、10%的中性福爾馬林
2、系列乙醇
3、蒸餾水
4、4%的多聚甲醛
操洽步驟 (僅供參考) :
(一)石蠟切片染色
1、組織固定于 10%中性福爾馬林,常規(guī)脫水包埋。
2、切片厚度 4um,常規(guī)脫蠟水。
3、蒸餾水水洗 1min。
4、切片入 Perls stain(見注意事項 4) ,浸染 15-30min。
5、蒸餾水充分沖洗 2-5min。
6、入核固紅染色液,淡染細胞核 5-10min。
7、自來水沖洗 1-5s。
8、常規(guī)脫水透明,中性樹膠封固。
( 二 ) 冰凍切片染色
1、 無需脫蠟,直接迅速用蒸餾水沖洗 2~3min。
2、 染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟。
( 三 ) 細胞染色
1、4%多聚甲醛固定 10~20min。
2、自來水沖洗 2 次,每次 2min。
3、蒸餾水沖洗 2 次,每次 2min。
4、染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟。
染色結(jié)果 :
含鐵血黃素或三價鐵 藍色
細胞核、其他組織 紅色
陰性對照 (可選)
取相同連續(xù)切片脫蠟水。置于 5%的草酸中,孵育 2-6h 后,經(jīng) Perla stain,需要步驟同上。結(jié)果為陰性。
注意事項 :
1、 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。
2、 組織固定常采用 10%的中性福爾馬林,經(jīng)普通福爾馬林長期固定后,組織會有損傷。避
免使用酸性固定劑,酪酸鹽處理也會妨礙鐵的保存。
3、 整個操作過程中容器要干凈,避免使用金屬鐵制品,洗切片和容器時以蒸餾水為宜,因
普通水內(nèi)含鐵質(zhì)。
4、 Perls stain 染色時,應(yīng)根據(jù)樣本情況調(diào)整著色時間。
5、 所有檢查切片都應(yīng)使用同一個陽性對照切片,選擇適合的對照非常重要.尸檢肺組織是一
個很好的對照,包含相當(dāng)數(shù)量的鐵陽性巨噬細胞(心衰細胞).
6、 系列乙醇應(yīng)經(jīng)常更換新液。
7、 冰凍切片和細胞的染色,好根據(jù)具體情況摸索實驗條件.
8、 為了您的健康和安全,請穿實驗服并戴一次性手套操作.
有效期 :12 個月
染色劑普魯士藍染色試劑盒(Perls stain,核固紅法)產(chǎn)品訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日新價格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
產(chǎn)品運輸說明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
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