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更新時(shí)間:2024-07-29 08:32:18瀏覽次數(shù):4080評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 25T |
---|---|---|---|
貨號(hào) | P1200 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 制膠試劑盒 SDS-PAGE凝膠配制試劑盒 |
蛋白質(zhì)電泳試劑SDS-PAGE凝膠制備試劑盒
貨號(hào) :P1200-1/P1200-2
規(guī)格 :25 塊/50 塊 SDS-PAGE 凝膠
產(chǎn)品內(nèi)容 :
P1200-1 | P1200-2 | 保存條件 | |
30%丙烯酰胺(29:1) | 100ml | 100ml×2 | 4℃,避光 |
1.5mol/LTris(pH8.8) | 100ml | 100ml×2 | 常溫 |
1.0mol/LTris(pH6.8) | 30ml | 60ml | 常溫 |
過硫酸銨干粉 | 1g | 2g | 干粉 4℃;溶液-20℃ |
10%SDS | 5ml | 10ml | 常溫 |
TEMED | 0.8ml | 1.5ml | 4℃,避光 |
說明書 | 一份 | 一份 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介 :
本公司生產(chǎn)的 SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒是按照經(jīng)典方法配制而成。本試劑盒提供了配制 SDS-PAGE 凝膠所需的各種試劑,用戶只需自備制膠器具和蒸餾水,即可配制 PAGE 膠。本試劑盒可配制不同規(guī)格、不同聚合度的 PAGE 膠(即聚丙烯酰胺凝膠) 約 25/50 塊。
聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺和交聯(lián)劑N,N-甲叉雙丙烯酰胺在加速劑N,N,N,N—四甲基乙二胺(簡(jiǎn)稱TEMED)和催化劑過硫酸銨(簡(jiǎn)稱AP)或核黃素(即vitamin B2)的作用下聚合交聯(lián)成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠,以此凝膠為支持物的電泳稱為聚丙烯酰胺凝膠電泳
(polyacrylamide gel electrophoresis,簡(jiǎn)稱PAGE)
SDS-PAGE是在要電泳的樣品中加入含有SDS和β-巰基乙醇(或者DTT)的樣品處理液,SDS可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu),β-巰基乙醇可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)。SDS還與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,這時(shí)各種蛋白質(zhì)分子本身的電荷*被SDS掩蓋。這樣電泳時(shí),就消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷及結(jié)構(gòu)上的差異,電泳速度只是與蛋白質(zhì)分子量有關(guān)。用本法測(cè)定蛋白質(zhì)的分子量只需根據(jù)待測(cè)蛋白質(zhì)在已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)圖中的位置,就能得知分子量。
注意事項(xiàng) :
1、TEMED 和 10%過硫酸銨后加,在加入前需混勻前面所加試劑。10%過硫酸銨在 4℃有效期為一周;TEMED 易揮發(fā),使用后請(qǐng)蓋緊瓶蓋。在常溫下膠 30 分鐘內(nèi)可以凝固,如溫度過低,可放 37℃溫箱凝固。灌完分離膠后,輕輕的加 1ml ddH2O 封上層,膠凝固后可見到分界線。灌濃縮膠前,先傾去水層,再用吸紙吸干。濃縮膠灌好后立刻插入梳子。濃縮膠凝固后,放入電泳液中(讓電泳液漫過加樣孔),輕輕的撥出梳子,可防加樣孔變形。
2、配制量可按上表等比加減。如果所用膠濃度與上面不同,可自行調(diào)整,主要是調(diào)整 30%丙烯酰胺的量(需要濃度×總體積/30%) ,后用水補(bǔ)足總體積。
配膠說明 :
1、先在過硫酸銨干粉中加入蒸餾水或去離子水(每克過硫酸銨需加水 10ml)配置成 10%溶液,將溶液分裝成小體積后凍存于-20℃,制備凝膠時(shí)融化后使用,10%過硫酸銨溶液現(xiàn)用現(xiàn)配,4℃有效期 7-30 天。
2、檢測(cè) SDS 溶液是否澄清,若出現(xiàn)絮狀物或沉淀可放 37℃片刻溶解,不影響效果。
3、根據(jù)目標(biāo)蛋白分子量大小,選取凝膠濃度,按下表配制。先配分離膠,再配濃縮膠。
分離膠 15% | 分離膠 12% | 分離膠 10% | 分離膠 8% | 濃縮膠 5% | |
總體積 | 10ml | 10ml | 10ml | 10ml | 5ml |
30%丙烯酰胺(29:1) | 5ml | 4ml | 3.3ml | 2.7ml | 0.83ml |
1M Tris-HCl (PH6.8) | 0 | 0 | 0 | 0 | 0.625ml |
1.5M TrisHCl(PH8.8) | 2.5ml | 2.5ml | 2.5ml | 2.5ml | 0 |
10%SDS | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 50ul |
10%過硫酸銨 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 75ul |
TEMED | 10ul | 10ul | 10ul | 10ul | 7.5ul |
ddH2O | 2.3ml | 3.3ml | 4.0ml | 4.6ml | 3.42m |
佳分離范圍 | 10-40kD | 12-60 kD | 20-80 kD | 30-90kD | — |
相關(guān)產(chǎn)品 :
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蛋白質(zhì)電泳試劑SDS-PAGE凝膠制備試劑盒訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。
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參考文獻(xiàn):
《Dexmedetomidine attenuates the neurotoxicity of propofol toward primary hippocampal neurons in vitro via Erk1/2/CREB/BDNF signaling pathways》 作者:Youbing Tu, Yubing Liang, Yong Xiao, Jing Lv, Ruicong Guan, Fei Xiao, Yubo Xie, and Qiang Xiao 期刊:Drug Design, Development and Therapy 影響因子:3.486 PMID:30858699
《Long noncoding RNA ENST00000413528 sponges microRNA‐593‐5p to modulate human glioma growth via polo‐like kinase 1》 作者:Ren Zhang,Ruo‐Lun Wei,Wei Du,Li‐Wei Zhang,Tao Du,Ya‐Dong Geng,Xin‐ting Wei 期刊:CNS Neuroscience & Therapeutics 影響因子:4.458 PMID:30924320
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