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DNA電泳試劑 SYBR Green I(10000×)
貨號:SY1020
規(guī)格:50/100ul
保存:-20℃避光保存,有效期 12 個月。
產品簡介:
采用瓊脂糖電泳或聚丙烯酰胺電泳方法檢測雙鏈 DNA 時,SYBR GreenⅠ是靈敏的熒光染料,當其結合到核酸上時,會產生很強的熒光及高量子產額,DNA/SYBR GreenⅠ復合物的量子產額均為 0.8。由于與核酸結合后能產生很強的信號,背景極低,并且對核酸的親和力高,因此 SYBR 染料可在低濃度條件下使用。
SYBR GreenⅠ的低檢出限:20pg DNA(254nm); 60pg DNA(300nm 紫外透射);此外,SYBR GreenⅠ還可以用于檢測寡核苷酸(1-2ng,300nm 紫外透射),比 EB 靈敏 20 100 倍。
SYBR GreenⅠ用于電泳檢測 DNA 時,既可預染,也可電泳后再進行染色。SYBR GreenⅠ用于瓊脂糖電泳檢測 DNA 后,可直接將 DNA 轉移膜上,進行后續(xù)核酸印跡雜交反應。此外,SYBR GreenⅠ與 DNA 的結合對多種常用的限制性內切酶活性無抑制作用,可直接進行消化或連接。
使用說明:
該產品使用方法同 EB.點染法: 用于瓊脂糖凝膠電泳: 取原液1ul加入TE緩沖液或滅菌雙蒸水1ml, 再加入6×DNA Loading buffer上樣緩沖液 1ml 混勻,(此時溶液為 1:2000 稀釋,即為工作液)電泳時取 1-2ul 工作液和 5ul 電泳樣品混勻后靜置 5min 后直接上樣。
膠染法:常規(guī)配置瓊脂糖凝膠 100ml,加熱融化,待溫度將 50-70℃(感覺不燙手)加入該原液 10ul。待膠凝固后即可電泳,電泳結束后即可在紫外照射下觀察。
注意事項:
1. SYBR GreenⅠ應避光存放,原液保存于-20℃;建議分裝凍存,短期可以 4℃保存。
2. 膠染法靈敏度較高,須將商品化的 DNA marker 稀釋 5-10 倍后使用。
3. 在預染色方法中,電泳時間不要超過 2 小時,否則 SYBR GreenⅠ會從 DNA 上分離出來,會產生彌散狀條帶。
4. 在常規(guī)用酒精沉淀核酸的過程中,SYBR Green I 可以全部從雙鏈核酸上去掉。
5. 在紫外照射透視下,與雙鏈 DNA 接合的 SYBR Green I 呈現綠色熒光。如果膠中含有單鏈 DNA則顏色為橘黃而不是綠色。
6. SYBR Green 對玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過程中用聚丙烯類容器。
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